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铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 246
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虫号: 701755
注册: 2009-02-15
性别: GG
专业: 植物进化生物学

[交流] 微卫星SSR引物设计已有9人参与

我在做一种植物的微卫星引物开发，现在已经对单克隆测序拿到了序列，利用SSR Hunter 也已经找到了SSR序列，现在想用primer primer5.0设计引物。
我是这方面的初学者，不太了解这个软件，想知道在设计引物的时候如何知道SSR片段两端的保守序列呢？
以下是我通过SSR Hunter 获得的其中一个SSR序列，有没有行家给讲解一下

TC 重复次数： 10 起始位置： 17701
17551tcatagaaatgggcggttggatcctccccttcaaatctccttctctctgcgtccaagactaatccaaaaaatcaggaatctagggtttgcttctcgctaatggccgacttcaactccttcgccccactgcagtaaagccagtgcggctgaTCTCTCTCTCTCTCTCTCTCgatctctcgagctggaagcaatggcggccgacgtatcggtgagttctgaggcggtcaagccgtgctgtgcgaaggtatgaatttctgggctttgtttgaattcttgtttcgagtttgttcaattggtgttcgatctcgaggttgggctga 17870

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dazey

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路人甲

1楼 2011-05-17 17:54:52

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xiao_v

铁虫 (初入文坛)

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注册: 2013-04-09
专业: 水产基础生物学

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖

一般来说上下游150BP就可以，你可以在primer5.0把SRR序列的上面150BP 和下游150BP 复制到软件中直接设计就可以了。SSR比较好出目的条带。上下游温度差不多50-55这样。3‘端别是A。其他的尽量别有错配，和二聚体就OK了。可以有聚丙酰胺凝胶电泳看下目的片段，如果不清楚就引物结合温度，如果有很多杂带就升高温度。检测的时候要用不是家系的群体跑。