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pidou213

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】酵母菌落PCR已有8人参与

请问做毕赤酵母表达的虫友们:

如果在做菌落PCR的时候,不用Lyticase的话,完全按照最普通的预变性94度,2min;(94度,1min;55度,1min;72度,1min)30循环,72度,7min的话,能否成功菌落PCR?

[ Last edited by pidou213 on 2010-5-11 at 22:33 ]
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pidou213

木虫 (正式写手)

好的,谢谢啦,主要是见到酵母表达手册上需要加入Lyticase,毕竟酵母的细胞很难破壁嘛!你怎么看呢?
引用回帖:
Originally posted by fungixx at 2010-05-11 11:41:04:

试试这个吧

见得多爱的多
8楼2010-05-11 22:35:41
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查看全部 13 个回答

jasco

木虫 (正式写手)

预变性94度,10min, 再往后做就可以了
3楼2010-05-11 11:27:03
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fungixx

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主

★ ★ ★
amisking(金币+3):不错! 2010-05-11 11:46:41

试试这个吧
几年前踏上火车那一刻都还没有意识到,从此故乡只有冬夏,再无春秋
4楼2010-05-11 11:41:04
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gaiyf

金虫 (正式写手)


scelab(金币+1):欢迎多来交流!:tiger06: 2010-05-11 19:40:53
pidou213(金币+1):谢谢你啊! 2010-05-11 22:38:20
如果你是直接挑斑pcr的话可是试试在pcr之前先挑取少量的菌斑与30ul无菌水中,然后先液氮冷冻再沸水浴,如此反复三次,然后再取适量的冻容好的液体做模板,效果很好的
多看文献,多学知识
5楼2010-05-11 12:00:22
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