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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】如何纯化质粒已有4人参与

我提的大肠杆菌质粒,OD260/OD280值为1.92~1.97不等,用什么方法能纯化使其OD260/OD280值在1.70~1.90之间,最好为1.80!
      我提的质粒是溶解在去离子水中的,想要具体方法,虫友帮忙!
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上

★ ★
scelab(金币+2):热心虫友,欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-03 21:58
比值高于1.8应该是RNA过多造成的.可以跑个胶看一下
以后在抽质粒过程中在solutionI或III中应该加入RNase
如果是试剂盒抽提的,RNA去的都应该还成?
现在的话可以直接加点RNase
终于熬成木虫了……
2楼2010-05-03 17:38:38
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
Originally posted by zjzz at 2010-05-03 17:38:38:
比值高于1.8应该是RNA过多造成的.可以跑个胶看一下
以后在抽质粒过程中在solutionI或III中应该加入RNase
如果是试剂盒抽提的,RNA去的都应该还成?
现在的话可以直接加点RNase

我在在抽质粒过程中在solutionIII有加入RNase处理30min,还是这样
3楼2010-05-03 17:56:03
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liyong1981

金虫 (正式写手)


muyuan(金币+2): 2010-05-04 15:18:52
感觉自己提的话,RNA很难除的干净,用kit就除的很干净,一直在思考,为什么呢?我想还是自己配的或者买的RNASE不是很好的缘故吧,另外用柱子的话也可以提高纯度~
4楼2010-05-04 11:33:22
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stliimoon

金虫 (小有名气)

你可以胶回收一下的,有胶回收试剂盒。
5楼2010-05-04 12:01:00
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