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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】如何纯化质粒
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)

[交流] 【求助/交流】如何纯化质粒 已有4人参与

我提的大肠杆菌质粒，OD260/OD280值为1.92~1.97不等，用什么方法能纯化使其OD260/OD280值在1.70~1.90之间，最好为1.80！
      我提的质粒是溶解在去离子水中的，想要具体方法，虫友帮忙！
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1楼 2010-05-03 17:10:36
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zjzz

木虫 (正式写手)

在通往变态的坦途上
★ ★
scelab(金币+2):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-05-03 21:58
比值高于1.8应该是RNA过多造成的.可以跑个胶看一下
以后在抽质粒过程中在solutionI或III中应该加入RNase
如果是试剂盒抽提的，RNA去的都应该还成？
现在的话可以直接加点RNase
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终于熬成木虫了……
2楼2010-05-03 17:38:38
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muyuan

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by zjzz at 2010-05-03 17:38:38:
比值高于1.8应该是RNA过多造成的.可以跑个胶看一下
以后在抽质粒过程中在solutionI或III中应该加入RNase
如果是试剂盒抽提的，RNA去的都应该还成？
现在的话可以直接加点RNase

我在在抽质粒过程中在solutionIII有加入RNase处理30min，还是这样
赞一下 回复此楼
3楼2010-05-03 17:56:03
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liyong1981

金虫 (正式写手)
muyuan(金币+2): 2010-05-04 15:18:52
感觉自己提的话，RNA很难除的干净，用kit就除的很干净，一直在思考，为什么呢？我想还是自己配的或者买的RNASE不是很好的缘故吧，另外用柱子的话也可以提高纯度～
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4楼2010-05-04 11:33:22
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stliimoon

金虫 (小有名气)
你可以胶回收一下的，有胶回收试剂盒。
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5楼2010-05-04 12:01:00
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