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yourandeziwo金虫 (小有名气)
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[交流]
【求助/交流】质粒DNA提取后的PCR 已有10人参与
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| 我前几天做了下大肠杆菌质粒DNA的提取情况，然后想做下跑胶回收，但是跑胶之前，我想做下PCR，哪位朋友有这方面的实验资料或者什么的么？先谢谢了。 |
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scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-27 22:45
scelab(金币+1):热心虫友，欢迎多来交流~~~:tiger06::tiger28::tiger23: 2010-04-27 22:45
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我不知道我理解的是否正确，你是想从质粒DNA中扩增你的目的基因，然后把扩增产物跑胶回收获得目的基因，是吧？ 如果是这样，那么你可以初步先采用下面这个PCR体系：1ul引物1，1ul引物2，2ul质粒DNA，2ul dNTP，0.5ul Ex Taq酶，5ul buffer，加入ddH2O补足总体系为50ul。注意加各种试剂的顺序：先加体积最大的ddH2O，然后是buffer、引物、DNA和dNTP，最后加酶。记得混匀体系。 上面的体系是较为粗放的，你可以先尝试一下，然后根据PCR的结果再调整更适宜的体系。 |
7楼2010-04-27 21:59:11