| 查看: 1949 | 回复: 19 | |||
Yakamoz325银虫 (小有名气)
|
[交流]
【求助/交流】关于使用AFLP的方法做遗传多样性的研究的几个问题 已有9人参与
|
|
大家好，我是分子生物学菜鸟，以前没有做过相关的研究 我现在想做一种植物的遗传多样性，大约有10个样点，每个样点采样50个，这样算来也就是说共有500个样，如果用AFLP的方法来做，大约需要多少钱呢？ 此外，是不是有AFLP的试剂盒卖，用试剂盒是不是要比常规的AFLP方法贵很多呢？ 谢谢大家了。 盼大家指点。 小木虫上的朋友向来热情，希望今天的帖子有人回复啊！ 万分感谢！ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有223人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- [原创]一种基于能带计算结果的载流子有效质量计算方法
已经有174人回复
- 菜鸟求助液相色谱简单问题！！！求关注
已经有12人回复
- 关于引物设计的问题
已经有5人回复
- gambit中网格划分问题
已经有6人回复
- 一个很简单的高物问题，呵呵
已经有23人回复
- 微生物分子生态学常用软件使用方法
已经有66人回复
- 请问cDNA-AFLP中酶切的问题，谢谢大家
已经有7人回复
- 阳离子光引发环氧树脂固化里的光源问题
已经有1人回复
- 微生物多样性研究的几个问题
已经有10人回复
- 有做AFLP的么？
已经有6人回复
- 【求助/交流】AFLP选扩产物弥散，请做过AFLP的同行们耽误几分钟帮忙看看
已经有5人回复
Yakamoz325
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 519.5
- 散金: 85
- 帖子: 215
- 在线: 9.1小时
- 虫号: 534195
- 注册: 2008-03-27
- 专业: 微生物生态学
2楼2010-04-27 09:38:53
liyong1981 
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
3楼2010-04-27 11:13:16
lyg7720349
铜虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 75.2
- 帖子: 145
- 在线: 9小时
- 虫号: 941449
- 注册: 2010-01-12
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2010-04-27 19:54:44
Yakamoz325
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 519.5
- 散金: 85
- 帖子: 215
- 在线: 9.1小时
- 虫号: 534195
- 注册: 2008-03-27
- 专业: 微生物生态学
5楼2010-04-27 21:17:06
Yakamoz325
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 519.5
- 散金: 85
- 帖子: 215
- 在线: 9.1小时
- 虫号: 534195
- 注册: 2008-03-27
- 专业: 微生物生态学
6楼2010-04-27 21:17:24
liyong1981
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
7楼2010-04-28 08:56:46
8楼2010-04-28 10:32:36
Yakamoz325(金币+10): 2010-04-28 18:21
|
AFLP的实验我们做了4年，可以和你交流下经验。如果你是首次做AFLP，实验室基础决定你的预算。 1.仪器 建议用伯乐的产品。我们用的是：伯乐sequencing cell。一套配下来估计（30万），其中梳子和垫片很重要。 优点是：操作简便，特别是灌胶，制胶的过程。 2.相关试剂 首先玻璃板和托盘。一般准备100-200个就够了，注意规格。我们的是56×38的（cm）；固定、漂洗、染色、脱色用的托盘要按照你玻璃板的规格而定，操作方便，不能太小也不能太大，太小，不便操作；太大，摇床的功率是问题。估计总共（700元） 其次试剂，AFLP所用是试剂很多，要注意的是：尿素的质量；其他的药品Acr&Bis、M剥离硅烷、亲和硅烷、溴芬蓝和二甲苯氰FF、TEMED、硼酸、甲醛、冰醋酸、无水碳酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银均按照技术指导就可以用。（1500） 第三PCR，这个就是根据你的需要了。我们用的如下：Tris、EDTA、β-巯基乙醇、PVP、CTAB、水饱和酚、MseI、EcoRI、T4 DNA连接酶、MseI adapter、EcoRI adapter、琼脂糖、Taq聚合酶、dNTP 、 Marker；引物的数量，一般是16×16组合的。（4000） 以上说的就是从DNA提取到、酶切、连接、PCR、银染整个过程用的药品和具体的花费。如果实验室有的话能节约很多，如果没有就要买了。 建议：用一次的试剂就“借”；消耗品都是些化学试剂，便宜；DD水的质量和数量不可小看。 3实验设计 不知道LZ 是做什么的，我们做的是资源方面的所以工作量很大，引物数和样品数决定决定你的预算。500个样，一个引物组合理想的话要跑（不同规格47、73、96）8板。我们一般一人一天4个板，人力成本就少，如果你一个人做，会高。 可以这样说，AFLP一板的成本（含人工）80左右（前提是实验室基础好），实验过程长比较辛苦。 经验交流，拍砖勿狠。 |
9楼2010-04-28 10:44:23
liyong1981
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 774.1
- 散金: 116
- 帖子: 905
- 在线: 35.2小时
- 虫号: 357405
- 注册: 2007-04-27
- 性别: GG
- 专业: antibody
10楼2010-04-28 10:47:45
