24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Yakamoz325

银虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 519.5
散金: 85
帖子: 215
在线: 9.1小时
虫号: 534195
注册: 2008-03-27
专业: 微生物生态学

[交流] 【求助/交流】关于使用AFLP的方法做遗传多样性的研究的几个问题已有9人参与

大家好，我是分子生物学菜鸟，以前没有做过相关的研究

我现在想做一种植物的遗传多样性，大约有10个样点，每个样点采样50个，这样算来也就是说共有500个样，如果用AFLP的方法来做，大约需要多少钱呢？
此外，是不是有AFLP的试剂盒卖，用试剂盒是不是要比常规的AFLP方法贵很多呢？

谢谢大家了。
盼大家指点。

小木虫上的朋友向来热情，希望今天的帖子有人回复啊！
万分感谢！

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

[原创]一种基于能带计算结果的载流子有效质量计算方法已经有174人回复
菜鸟求助液相色谱简单问题！！！求关注已经有12人回复
关于引物设计的问题已经有5人回复
gambit中网格划分问题已经有6人回复
一个很简单的高物问题，呵呵已经有23人回复
微生物分子生态学常用软件使用方法已经有66人回复
请问cDNA-AFLP中酶切的问题，谢谢大家已经有7人回复
阳离子光引发环氧树脂固化里的光源问题已经有1人回复
微生物多样性研究的几个问题已经有10人回复
有做AFLP的么？已经有6人回复
【求助/交流】AFLP选扩产物弥散，请做过AFLP的同行们耽误几分钟帮忙看看已经有5人回复

您不认识我。

1楼 2010-04-26 09:40:11

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

特洛伊

金虫 (小有名气)

MolEPI: 1
应助: 0 (幼儿园)
金币: 540.2
散金: 40
红花: 1
帖子: 100
在线: 73.8小时
虫号: 573201
注册: 2008-06-13
性别: GG
专业: 植物生殖生物学

Yakamoz325(金币+10): 2010-04-28 18:21

AFLP的实验我们做了4年，可以和你交流下经验。如果你是首次做AFLP，实验室基础决定你的预算。
1.仪器
建议用伯乐的产品。我们用的是：伯乐sequencing cell。一套配下来估计（30万），其中梳子和垫片很重要。
优点是：操作简便，特别是灌胶，制胶的过程。
2.相关试剂
首先玻璃板和托盘。一般准备100-200个就够了，注意规格。我们的是56×38的（cm）；固定、漂洗、染色、脱色用的托盘要按照你玻璃板的规格而定，操作方便，不能太小也不能太大，太小，不便操作；太大，摇床的功率是问题。估计总共（700元）
其次试剂，AFLP所用是试剂很多，要注意的是：尿素的质量；其他的药品Acr&Bis、M剥离硅烷、亲和硅烷、溴芬蓝和二甲苯氰FF、TEMED、硼酸、甲醛、冰醋酸、无水碳酸钠、硫代硫酸钠、硝酸银均按照技术指导就可以用。（1500）
第三PCR，这个就是根据你的需要了。我们用的如下：Tris、EDTA、β-巯基乙醇、PVP、CTAB、水饱和酚、MseI、EcoRI、T4 DNA连接酶、MseI adapter、EcoRI adapter、琼脂糖、Taq聚合酶、dNTP 、 Marker；引物的数量，一般是16×16组合的。（4000）
以上说的就是从DNA提取到、酶切、连接、PCR、银染整个过程用的药品和具体的花费。如果实验室有的话能节约很多，如果没有就要买了。
建议：用一次的试剂就“借”；消耗品都是些化学试剂，便宜；DD水的质量和数量不可小看。
3实验设计
不知道LZ 是做什么的，我们做的是资源方面的所以工作量很大，引物数和样品数决定决定你的预算。500个样，一个引物组合理想的话要跑（不同规格47、73、96）8板。我们一般一人一天4个板，人力成本就少，如果你一个人做，会高。
可以这样说，AFLP一板的成本（含人工）80左右（前提是实验室基础好），实验过程长比较辛苦。
经验交流，拍砖勿狠。