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bill007

铜虫 (正式写手)

[交流] 【求助/交流】电泳拖尾问题 已有13人参与

各位前辈:
最近Rt—pcr后,琼脂糖电泳,2%浓度
出现拖尾现象,包括mark泳道
不知可能是什么原因?请不吝赐教!
谢谢!
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shengwufenzi

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
lstt09nk(金币+2):欢迎多多交流~~ 2010-04-25 12:39
(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样。(3)电压太高。(4)适当把你的胶的浓度加大。(根据你的片断大小而定)
2楼2010-04-25 08:20:17
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yujiaping1

木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
换新电泳液
3楼2010-04-25 12:14:21
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asd123xukun

铜虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
Q:为什么带出现拖尾现象?
A:主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。
处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度。
4楼2010-04-25 13:58:34
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凡龙

金虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引用回帖:
Originally posted by asd123xukun at 2010-04-25 13:58:34:
Q:为什么带出现拖尾现象?
A:主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。
处理办法:加样前离心;选择适当的样品缓冲液,加适量样品促溶剂;电泳缓冲液时间过长,重新配制;降低凝胶浓度。

降低凝胶浓度
5楼2010-04-25 15:02:14
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tuodecai

铁杆木虫 (著名写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
本人觉得与你跑胶没关系,是你pcr的问题,出现了smear。
6楼2010-04-25 15:26:23
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馨沁

木虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
电泳液污染可能性较大
7楼2010-04-25 16:55:34
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entomology557

铁杆木虫 (知名作家)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
顶,应该差不多就是电泳液的问题了
生物进化基本常识:一定范围内,选择压力越大,要么进化的越快来适应这种压力,或者直接被淘汰。
8楼2010-04-25 18:21:12
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冬虫夏草1

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
(2)上样时飘样了(2)可能是电泳缓冲液TAE或者TBE有问题。
倚楼听风雨,淡看江湖路!
9楼2010-04-25 21:42:03
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wordsworth3180

木虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
缓冲液最好还是用新鲜的
10楼2010-04-26 10:16:47
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