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zxyjenny6

新虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】5500bp的片段PCR问题已有18人参与

各位大侠:本人最近在做一段5500bp的目的基因的PCR,采用的是takara的EX TAQ酶,选择的引物应该没有问题,按照相关原则设定了反应条件,并且在此基础上稍作改变尝试了几次,但都没有P出来。想请问各位,有没有什么好的建议或者应该怎样改进反应条件,能把我要的目的基因P出来。O(∩_∩)O谢谢!
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阿娇

金虫 (正式写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
1949stone(金币+2): 2010-04-25 13:11
你扩的片段太长,72度延伸时间应该延长。平常小片段是30s到1min。我扩4kbp的用3min。也是用Takara的酶,你扩5k多的应该要4min吧。可能3min也行了。祝你成功
7楼2010-04-24 20:22:48
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