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x8q4h11

木虫 (小有名气)

[交流] 急!毕赤酵母表达问题 已有1人参与

构建了毕赤酵母GS115重组菌,使用甲醇诱导就是诱导不出来,请大家帮忙分析分析,不胜感激!
我是用的是载体是pPIC3.5K,提基因组使用目的基因自身的引物和5AOX、3AOX都能PCR成功,能确定是阳性重组菌,可就是诱导不出来……
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by zhaocy8903 at 2009-11-26 15:22:
pPIC3.5K是包内表达吧
用什么方法检测没有表达的

SDS-PAGE   没有目的蛋白条带……
4楼2009-11-26 22:33:55
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your2007

至尊木虫 (著名写手)

要用载体特异性引物p吧,另外整合方向怎么样要清楚哦,
爱人者被爱,敬人者人敬
2楼2009-11-26 13:05:03
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zhaocy8903

木虫 (知名作家)

pPIC3.5K是包内表达吧
用什么方法检测没有表达的
3楼2009-11-26 15:22:54
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x8q4h11

木虫 (小有名气)

引用回帖:
Originally posted by your2007 at 2009-11-26 13:05:
要用载体特异性引物p吧,另外整合方向怎么样要清楚哦,

5AOX、3AOX就是引物特异性引物,能P出来,就是诱导不出来
5楼2009-11-26 22:35:12
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