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llzhang2012

[交流] 克隆基因全长引物设计问题 已有9人参与

已知一序列全长,如何根据此序列设计引物克隆出全长,我是新手,麻烦各位详细介绍一下设计全长引物的步骤,最近实验急需,非常感谢!!!
  我以前克隆过片段,没有做过全长,引物设计的一些基本原则都已了解,但是设计全长引物一点都不懂,劳烦各位,谢谢!
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wangqk198738

金虫 (正式写手)

视情况而定

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2,VIP+0): 11-6 08:18
要是基因不长,在一千到两千bp那就设计一个引物,要是很长就分段设计,逐步克隆,引物长度一般在12-25bp。有专门的引物设计软件,很好用的,你都知道全场了,想必是什么都知道了,那就对照着做好了,挑选一段特异性好的设计引物,成功的概率大。祝好!
8楼2009-11-06 07:32:55
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xiangao

金虫 (正式写手)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
从ATG开始设计上游引物   TAA处设计下游引物
3楼2009-11-04 16:22:43
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小白3521

金虫 (小有名气)

★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物上要加酶切位点和保护碱基
4楼2009-11-04 17:02:39
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llzhang2012

引用回帖:
Originally posted by 小白3521 at 2009-11-4 17:02:
引物上要加酶切位点和保护碱基

具体要怎样加啊?
5楼2009-11-05 15:31:25
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