24小时热门版块排行榜    

CyRhmU.jpeg
查看: 2923  |  回复: 14
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

bio_linda

[交流] PCR退火温度已有2人参与

各位虫友大家好!
    我拿到的引物退火温度一个是69度,一个62度,PCR程序退火温度设多少合适呀?我做的梯度是从52到65的,低温时在2000和1500左右有微弱的条带(目的条带900左右),中间温度扩出来的在250到100之间有明亮的引物二聚体,高温没有任何条带。
    我想再重新p一次,请问大家,从这种结果看,我的退火温度取什么范围的梯度合适呀?还是要重新设计引物?
    O(∩_∩)O谢谢~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhang6871

银虫 (正式写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这么情况我们也遇到过,不过没有这么高的Tm值。我们一般是取中间温度,比如你这对引物,取64摄氏度应该可以扩出来的,但是估计会有杂带出现的。
过于功利,浮躁,布满灰尘的心都是创新的杀手!多记,心静,多动手,贴近大自然!
3楼2009-08-14 01:03:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

sgba0307

铁虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
没有出现过目的条带》?改变模板的浓度试试
2楼2009-08-13 19:39:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

genetics183

木虫 (正式写手)

应该避免两条引物Tm值相差太大。
士虽有学,而行为本焉。
4楼2009-08-14 09:12:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xxy11

铁杆木虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
引物的退火温度相差不要超过2度
5楼2009-08-14 11:27:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复(可上传附件)
信息提示
请填处理意见