应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白/酶 » 荧光素(FITC)标记蛋白质
6961/14返回列表123456下一页末页
查看: 34590  |  回复: 695
只看楼主@他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
【奖励】 本帖被评价260次，作者gan01204增加金币 200.15 个

gan01204

至尊木虫 (著名写手)

[资源] 荧光素(FITC)标记蛋白质

利用某些物质对蛋白质标记从而对其进行检测分析的方法有多种，
常用的方法有同位素标记，荧光标记等。

同位素标记对人体危害较大，同时也需要配备特殊仪器，故目前该法使用较少；
但它可以达到定量检测分析的目的。

使用更为广泛的是利用荧光素对蛋白质进行标记。
它的主要原理是利用FITC(异硫氰酸荧光素)上的N=C=S基团和蛋白质上游离的-NH2发生化学反应，而后在特定波长光源的激发下即可观测到荧光信号。

常用检测仪器：
  普通检测用的荧光显微镜、更高级的可以用激光扫描共聚焦显微镜。


在小木虫上查了下，还没有看到关于FITC标记蛋白质具体适用操作过程的帖子。
附件是我利用FITC标记蛋白质(BSA)的实验操作过程，详细具体，绝对原创。
希望对大家有所帮助。

[ Last edited by amisking on 2010-6-9 at 19:36 ]
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验 医学硕博资料大全 实验技术 淘来的学习资料
nanoparticles&quantumdots 文件 技术原理 荧光标记
天马行空 收藏 文献

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

石姗SXL 珞璎跟风 Lydia_Lv cjh112886 yugezi11 melody-chao xinghuo8166 hukaimmiww zcyjdd zcyjdd 梦流殇mm

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼2009-07-18 15:53:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

gan01204

至尊木虫 (著名写手)
“用透析法来荧光标记蛋白”，这个我不是很明白~~希望能说得清楚些。
我在进行荧光标记蛋白质的过程中，最后一步用Sephadex G-50葡聚糖凝胶将BSA-FITC, BSA, FITC分离开，以收集较纯的BSA-FITC，感觉效果还不错。

具体还有什么疑问请QQ联系：346802296
赞一下(3人) 回复此楼
12楼2009-10-20 11:14:49
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

maomao809920

金虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

刚好就要做这个了 谢谢~~！！！
赞一下(2人) 回复此楼
37楼2011-07-14 19:00:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gan01204

至尊木虫 (著名写手)
那么多人看终于等到有人回帖了~~
不容易啊！！
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2009-08-29 14:30:28
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

scsgp

木虫 (职业作家)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

谢谢
回复此楼
2楼2009-08-24 00:03:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaorujing


请问这与GFP完全是平行关系的两码事吗？
赞一下 回复此楼
4楼2009-08-29 19:04:07
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gan01204

至尊木虫 (著名写手)
不是一回事~~
回复此楼
5楼2009-08-31 21:26:56
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bioman9810

木虫 (著名写手)

★★★ 三星级,支持鼓励

谢谢，学习...
回复此楼
6楼2009-09-04 10:07:06
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小神300

新虫 (初入文坛)
最近刚好要做这方面的实验，用荧光染料标记蛋白，正在选荧光染料中，
想请问一下，在选择荧光染料的时候有没有特殊的要求，因为我的蛋白标记后还要继续作用细胞，所以想荧光标记蛋白后对其本身的活性影响不是很大，不然就无法继续下面的实验
另外，不知楼主对bodipy系列的染料了解多不多，看了文献，好像bodipy系列的染料相比较FITC类的对ph要不敏感，应该有取代FITC的趋势。
，期待回复～～～。谢谢！！！！
赞一下 回复此楼
7楼2009-10-15 15:40:50
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gan01204

至尊木虫 (著名写手)
1. 关于荧光素的选择：
    选择荧光染料的时候没有什么特殊的要求，只要能将蛋白质染上颜色且能用相关仪器进行检测即可。

2. 荧光标记蛋白后对其本身活性的影响：
    严格来说，只要对蛋白质进行过处理后，或多或少都会影响其生物性能。但一般的处理影响不大，若实验对蛋白质活性要求不是很严格的话，这种影响可以忽略。

3. 蛋白标记后继续作用细胞：
    据以上观点，对蛋白质进行标记后还可继续作用于细胞。但在检测时应注意细胞对荧光信号检测的影响。

4. 关于bodipy系列的染料：
    我对这类染料了解不多，不敢妄加评论~~见谅。
    FITC是一类使用很广泛的荧光染料。
赞一下 回复此楼
8楼2009-10-17 10:33:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rava

金虫 (小有名气)

★★★ 三星级,支持鼓励

FITC的确对环境的pH较为敏感，特别是羧酸根的质子化会明显降低其荧光量子产率。不过人们标记FITC除其荧光性质外还可以利用其免疫作用，仅就其荧光性能而言FITC远不是最好的。bodipy有丰富的修饰种类，荧光性能调节范围很宽，而且稳定。
赞一下 回复此楼
9楼2009-10-17 10:52:04
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gan01204

至尊木虫 (著名写手)
有见地~~
有增长了些知识！
赞一下 回复此楼
10楼2009-10-18 15:00:52
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小神300

新虫 (初入文坛)
谢谢gan01204和rava的回复，不好意思，过这么多天才来道谢。
想再问下楼主，你有用过透析法来荧光标记蛋白没，这种方法效率高不高的
赞一下 回复此楼
11楼2009-10-20 11:00:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

caj101

银虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

本人专门做bodipy的染料及其功能分子，对其合成很了解。不过对于生物学应用知道的不是太多，想请教一个问题：细胞培养结束后，如何将细胞内的酸性降低到7.4附近？是否应该在细胞培养阶段就应该加以控制？谢谢！
赞一下 回复此楼
13楼2009-10-23 20:40:45
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gan01204

至尊木虫 (著名写手)

回复“caj101 ”

我不是做细胞的，对于你这个问题也不好回答~~
问了相关人士，答复如下：
若想将细胞内的PH值调至7.4，可以在培养结束后重新将细胞培养于PH=7.4的细胞培养液中一段时间，从而可使细胞内的PH值接近7.4~
赞一下 回复此楼
14楼2009-10-24 14:07:51
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lanfenfei

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
Originally posted by gan01204 at 2009-10-17 10:33:54:
1. 关于荧光素的选择：
    选择荧光染料的时候没有什么特殊的要求，只要能将蛋白质染上颜色且能用相关仪器进行检测即可。

2. 荧光标记蛋白后对其本身活性的影响：
    严格来说，只要对蛋白质进行过处理后， ...

这些知识对我太重要了，感谢楼主！！！
赞一下 回复此楼
15楼2010-03-22 15:18:46
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wujing11778

金虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

非常感谢！
回复此楼
16楼2010-06-01 22:24:43
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

85715623

木虫 (正式写手)

★ 一星级,一般

好，顶！
回复此楼
17楼2010-06-02 07:27:22
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

onlyjianli

铜虫 (初入文坛)
谢谢，学习了
回复此楼
18楼2010-06-04 15:40:14
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

weiyanbme

木虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by gan01204 at 2009-07-18 15:53:47:
利用某些物质对蛋白质标记从而对其进行检测分析的方法有多种，
常用的方法有同位素标记，荧光标记等。

同位素标记对人体危害较大，同时也需要配备特殊仪器，故目前该法使用较少；
但它可以达到定量检测分析的 ...

下不了，白白浪费了一个金币啊
怎么回事
楼主能发到我邮箱里么
谢谢了哦
weiyanbme@gmail.com
赞一下 回复此楼
19楼2010-06-04 16:08:54
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gan01204

至尊木虫 (著名写手)
引用回帖:
Originally posted by weiyanbme at 2010-06-04 16:08:54:


下不了，白白浪费了一个金币啊
怎么回事
楼主能发到我邮箱里么
谢谢了哦
weiyanbme@gmail.com

已经发送至你邮箱了~~
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2010-06-09 18:06:29
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zengfuxing

银虫 (小有名气)

★★★ 三星级,支持鼓励

好东西，学到了
回复此楼
21楼2010-06-09 19:15:08
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

二氧化钛

金虫 (小有名气)
我下不了，麻烦楼主给发一个，不胜感激
赞一下 回复此楼
22楼2010-06-22 15:07:40
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

月下独酌

木虫 (著名写手)

★★★ 三星级,支持鼓励

很感谢楼主
回复此楼
23楼2011-01-13 23:56:23
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xhjggl

木虫 (正式写手)

★ 一星级,一般

上海生工有代理进口的试剂盒卖。

HOOK™ Dye Labeling Kit (FITC)
蛋白FITC荧光素标记试剂盒       
Description:
FITC (fluorescein isothiocyanate) is a commonly used fluorescent label for proteins, as it contains the groups required for conjugating to amino, sulfhydryl, imidazoyl, tyrosyl or carbonyl groups of proteins. FITC has a molecular weight of 389, and excitation and emission wavelengths of 494nm and 520nm, respectively, therefore emitting green visible light.This kit utilizes Tube-O-Reactor™, which allows for the reactions to be performed in a single tube, with no loss of essential reagents and minimum hands-on time and effort.
Features:
Dye preweighed and supplied in single use  vials (Also available separately);Suitable for most proteins;Utilizes single Tube Reactor for minimum hands on time.application for Labeling of a green fluorescent dye to proteins and peptides. And Suitable for antibody labeling. Store: -15～-20℃
编号        包装        价格        产地
786-059           5 Reactions        2,709        GBios
赞一下 回复此楼
24楼2011-01-14 13:41:16
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gylu

金虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

好东西，谢谢啦！
回复此楼
25楼2011-01-26 23:39:47
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luona

金虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

谢谢，学习学习。
回复此楼
26楼2011-01-27 03:01:01
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

exon2002

铁杆木虫 (著名写手)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

好贴呀，我帮你顶一下啦
回复此楼
27楼2011-02-08 06:45:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

造血干细胞

铜虫 (初入文坛)
多谢分享
回复此楼
32楼2011-06-18 10:43:31
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

q307078056

银虫 (正式写手)

★★★ 三星级,支持鼓励

哎呀，这可真是。。。   不是我的领域，看起来真吃力
赞一下 回复此楼
33楼2011-06-21 23:41:03
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

oasisleu

捐助贵宾 (初入文坛)

★★★ 三星级,支持鼓励

为什么不能下载
回复此楼
36楼2011-07-09 20:07:12
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

karin

木虫 (小有名气)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

很好
回复此楼
39楼2011-09-21 10:06:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

晚香玉

木虫 (正式写手)

★★★★★ 五星级,优秀推荐

好东西，一直在寻找！
赞一下 回复此楼
42楼2011-09-28 15:04:39
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小丫的维尼熊

木虫 (小有名气)

★ 一星级,一般

谢谢。继续努力，加油。
赞一下 回复此楼
43楼2011-09-28 16:33:17
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lvye3707

金虫 (正式写手)

★ 一星级,一般

谢了
回复此楼
45楼2011-09-29 11:11:58
 已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
leewolf28楼
2011-05-13 10:10   回复  
三星好评  顶一下，感谢分享！
ggqi29楼
2011-05-17 09:37   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
jiangkuo052030楼
2011-06-18 09:57   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
造血干细胞31楼
2011-06-18 10:41   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
delmar34楼
2011-06-23 19:30   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
bluewind101835楼
2011-06-25 18:06   回复  
三星好评  顶一下，感谢分享！
悦迷00838楼
2011-07-15 10:32   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
pplu032940楼
2011-09-21 16:59   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
dreamerfei41楼
2011-09-27 02:37   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
churanran44楼
2011-09-28 20:41   回复  
三星好评  顶一下，感谢分享！
hallhowe46楼
2011-10-01 15:47   回复  
三星好评  顶一下，感谢分享！
cainiao12347楼
2011-10-21 12:49   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
hqwzj198748楼
2011-10-24 16:41   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
hqwzj198749楼
2011-10-24 16:42   回复  
顶一下，感谢分享！
haodj50楼
2011-10-25 23:22   回复  
五星好评  顶一下，感谢分享！
相关版块跳转 我要订阅楼主 gan01204 的主题更新
6961/14返回列表123456下一页末页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复(可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[教师之家] [吃瓜]网传江苏某高校人事处处长被打 +12 Blues汪 2024-12-27 13/650 2024-12-29 13:13 by mapenggao
[基金申请] 现在报基金要打招呼吗 +7 akslis2024 2024-12-25 10/500 2024-12-29 12:06 by LIU_V
[论文投稿] 学位论文漏引了一篇文献，怎么办 20+7 青椒1234 2024-12-25 11/550 2024-12-29 11:07 by 前田庆次
[教师之家] 是博后，有国自然青年基金，省青年基金，文章5篇左右，能找到个什么样的岗位 +15 Shxjjxjkx 2024-12-27 17/850 2024-12-29 09:07 by Quakerbird
[海外博后] 美国的华人副教授可以用中文交流吗 +3 啊哦呃咦呜吁 2024-12-28 3/150 2024-12-29 04:04 by Fenixknick
[教师之家] 浙大女生被MIT开除，女生称自己在浙江大学本科阶段就一直用这种方式收集数据发论文 +11 苏东坡二世 2024-12-27 11/550 2024-12-29 00:09 by eemdl
[教师之家] nature comm, 浙大今年293篇，北大，288篇 +10 babu2015 2024-12-26 13/650 2024-12-28 23:50 by jurkat.1640
[考博] 自己找博士可真难啊 +14 鸡腿啦啦啦 2024-12-23 22/1100 2024-12-28 23:30 by 学员Yuy89B
[基金申请] 个人感觉，国家基金越来越不资助基础研究了。 +3 kczhang 2024-12-28 3/150 2024-12-28 19:29 by xiaoai040
[考博] 矿加博士报考 +4 阿斯蒂芬11234 2024-12-25 4/200 2024-12-28 14:46 by 跳鱼拨刺
[考研] 考研英语背单词 +4 Dicyw 2024-12-25 6/300 2024-12-28 10:54 by maolC
[考博] 2025博士申请 +4 Apple@888 2024-12-24 11/550 2024-12-27 16:23 by xmcxmcchem
[考博] HIT研三申博自荐-超快激光应用方向 +9 天天yyds 2024-12-25 12/600 2024-12-27 14:17 by 明海天涯
[考研] 340求调剂本科985多科研经历 +3 白昭0927 2024-12-25 9/450 2024-12-27 13:25 by 白昭0927
[考研] 325求调剂 +7 2020211033 2024-12-25 7/350 2024-12-27 11:40 by @卯兔
[基金申请] 北京市自然科学基金的面上项目 +3 yuleib84 2024-12-25 7/350 2024-12-27 09:01 by zqj3102112
[考博] 定向就业，毕业证学位证由工作单位领取？ +6 河西夜郎 2024-12-22 7/350 2024-12-26 06:54 by 柳成阴
[考博] 2025届化工专业博士申请 5+3 Hkeyan 2024-12-23 5/250 2024-12-25 08:47 by highxixi
[论文投稿] 求助，要不要根据审稿人的要求引用他们的文献？ 20+3 angel8533 2024-12-24 7/350 2024-12-24 22:32 by nono2009
[论文投稿] 三个手稿 10+5 s爱吃芒果 2024-12-22 9/450 2024-12-23 16:32 by 世界之源
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭