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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)

[交流] 固相多肽合成荧光素标记问题 已有6人参与

请问大家固相多肽合成对树脂上的多肽进行荧光素标记,容易标吗?为什么我标了两次都没有成功啊?有什么技巧,应该是比较容易的啊。
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求平安幸福
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
相对来谁容易,看你要标记的是什么了,不同的标记都有不同的方法,还有就是你想标记到什么基团上
索马鲁肽,利拉鲁肽,德谷胰岛素,InsulinIcodec胰岛素侧链,发酵索玛/利拉直链热卖
2楼2012-11-29 14:12:34
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 悠悠落叶 at 2012-11-29 14:12:34
相对来谁容易,看你要标记的是什么了,不同的标记都有不同的方法,还有就是你想标记到什么基团上

我就是在多肽的N端标记FITC啊,N端有游离的氨基,固相合成多肽后,碱性条件下在树脂上直接连接FITC,最后再切割下来,应该很容易啊,但就是没成功,为什么?请指教啊!
求平安幸福
3楼2012-11-29 17:28:37
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
FITC你用的什么溶剂啊,反应多久啊,用的是FITC的异硫氰酸酯,溶剂选择DMFCM:吡啶,反应时间长点就行了,避光
索马鲁肽,利拉鲁肽,德谷胰岛素,InsulinIcodec胰岛素侧链,发酵索玛/利拉直链热卖
4楼2012-11-30 10:34:47
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 悠悠落叶 at 2012-11-30 10:34:47
FITC你用的什么溶剂啊,反应多久啊,用的是FITC的异硫氰酸酯,溶剂选择DMFCM:吡啶,反应时间长点就行了,避光

FITC是异硫氰根荧光素,溶剂是无水DMF,DIEA调节碱性,避光过夜,但就是没连接成功。
求平安幸福
5楼2012-11-30 15:19:49
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
5楼: Originally posted by wuchunlei332 at 2012-11-30 15:19:49
FITC是异硫氰根荧光素,溶剂是无水DMF,DIEA调节碱性,避光过夜,但就是没连接成功。...

我们一般的选用的是DMFCM:吡啶混合反应的,比例大概是12:7:5体积比,你试一试,看看行不行
索马鲁肽,利拉鲁肽,德谷胰岛素,InsulinIcodec胰岛素侧链,发酵索玛/利拉直链热卖
6楼2012-12-03 09:06:13
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Xiaobin_deam

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本人从事多肽合成数年,可以为你解答任何问题,同时可以提供HPLC  MS等检测服务
7楼2012-12-15 19:50:50
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Xiaobin_deam

铁虫 (初入文坛)


其实这个荧光标记十分简单,只是你犯了低级错误而已
8楼2012-12-15 19:51:51
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xudan90

禁虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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9楼2012-12-17 14:21:32
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Xiaobin_deam at 2012-12-15 19:51:51
其实这个荧光标记十分简单,只是你犯了低级错误而已

犯了什么低级错误?
求平安幸福
10楼2013-03-12 16:32:03
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