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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 固相多肽合成荧光素标记问题
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)

[交流] 固相多肽合成荧光素标记问题 已有6人参与

请问大家固相多肽合成对树脂上的多肽进行荧光素标记，容易标吗？为什么我标了两次都没有成功啊？有什么技巧，应该是比较容易的啊。
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求平安幸福
1楼 2012-11-29 13:21:45
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)
★
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相对来谁容易，看你要标记的是什么了，不同的标记都有不同的方法，还有就是你想标记到什么基团上
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索马鲁肽，利拉鲁肽，德谷胰岛素，InsulinIcodec胰岛素侧链，发酵索玛/利拉直链热卖
2楼2012-11-29 14:12:34
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 悠悠落叶 at 2012-11-29 14:12:34
相对来谁容易，看你要标记的是什么了，不同的标记都有不同的方法，还有就是你想标记到什么基团上

我就是在多肽的N端标记FITC啊，N端有游离的氨基，固相合成多肽后，碱性条件下在树脂上直接连接FITC，最后再切割下来，应该很容易啊，但就是没成功，为什么？请指教啊！
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求平安幸福
3楼2012-11-29 17:28:37
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)
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FITC你用的什么溶剂啊，反应多久啊，用的是FITC的异硫氰酸酯，溶剂选择DMFCM：吡啶，反应时间长点就行了，避光
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索马鲁肽，利拉鲁肽，德谷胰岛素，InsulinIcodec胰岛素侧链，发酵索玛/利拉直链热卖
4楼2012-11-30 10:34:47
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 悠悠落叶 at 2012-11-30 10:34:47
FITC你用的什么溶剂啊，反应多久啊，用的是FITC的异硫氰酸酯，溶剂选择DMFCM：吡啶，反应时间长点就行了，避光

FITC是异硫氰根荧光素，溶剂是无水DMF，DIEA调节碱性，避光过夜，但就是没连接成功。
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求平安幸福
5楼2012-11-30 15:19:49
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悠悠落叶

金虫 (正式写手)
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引用回帖:
5楼: Originally posted by wuchunlei332 at 2012-11-30 15:19:49
FITC是异硫氰根荧光素，溶剂是无水DMF，DIEA调节碱性，避光过夜，但就是没连接成功。...

我们一般的选用的是DMFCM：吡啶混合反应的，比例大概是12:7:5体积比，你试一试，看看行不行
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索马鲁肽，利拉鲁肽，德谷胰岛素，InsulinIcodec胰岛素侧链，发酵索玛/利拉直链热卖
6楼2012-12-03 09:06:13
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Xiaobin_deam

铁虫 (初入文坛)
★
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本人从事多肽合成数年，可以为你解答任何问题，同时可以提供HPLC  MS等检测服务
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7楼2012-12-15 19:50:50
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Xiaobin_deam

铁虫 (初入文坛)
其实这个荧光标记十分简单，只是你犯了低级错误而已
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8楼2012-12-15 19:51:51
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xudan90

禁虫 (初入文坛)
★
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本帖内容被屏蔽
9楼2012-12-17 14:21:32
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wuchunlei332

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Xiaobin_deam at 2012-12-15 19:51:51
其实这个荧光标记十分简单，只是你犯了低级错误而已

犯了什么低级错误？
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求平安幸福
10楼2013-03-12 16:32:03
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