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小雨莎莎

木虫 (正式写手)

[交流] 请教一下:用Alexa Fluor 647标记后的蛋白活性会不会受影响 已有4人参与

在国内某公司购买的hrHGF,让公司帮忙标记小分子荧光素Alexa Fluor 647,不知道该小分子标记到蛋白上的原理是什么?会不会影响蛋白的活性呢?因为我们接下来的实验需要利用该蛋白的活性的,所以对活性的大小十分看重。希望懂行的虫友能够指点一下……谢谢!
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ashui001

木虫 (著名写手)


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标的好活性影响不大的,要看公司采用的是什么方法标记了,常见的EDC法,或者戊二醛法都可以,主要是要确定好偶联剂的浓度,荧光分子和蛋白浓度比例
kundaobio.com,昆道生物,量子点合成、修饰及其生物医学应用,量子点荧光抗体定制和服务
2楼2011-11-01 22:27:24
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小雨莎莎

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ashui001 at 2011-11-01 22:27:24:
标的好活性影响不大的,要看公司采用的是什么方法标记了,常见的EDC法,或者戊二醛法都可以,主要是要确定好偶联剂的浓度,荧光分子和蛋白浓度比例

谢谢!好像是用Invitrogen公司的试剂盒标记的~不知道是什么原理……
3楼2011-11-02 08:35:53
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protein_ex

新虫 (初入文坛)


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alexa fluor 488 标记的是amino group,所有的NH2都能被标记,不会影响活性,也有的dye标记thiol group 你看这篇文章,“Chemical Visualization of an Attractant Peptide, LURE” 他们用的alexa fluor488 标记,不影响活性。祝好哟
4楼2011-11-03 06:18:18
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lovexiaoling

新虫 (初入文坛)


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楼主,我最近也在用Alexa Fluor 荧光素标记,我想问一下你最后怎么做的啊
能不能给我详细的方法
5楼2014-05-27 23:55:20
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小雨莎莎

木虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lovexiaoling at 2014-05-27 23:55:20
楼主,我最近也在用Alexa Fluor 荧光素标记,我想问一下你最后怎么做的啊
能不能给我详细的方法

呵呵,好久远啦,我最后是让公司给我标记了~
6楼2014-06-05 17:13:47
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孔令伟

新虫 (初入文坛)


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引用回帖:
5楼: Originally posted by lovexiaoling at 2014-05-27 23:55:20
楼主,我最近也在用Alexa Fluor 荧光素标记,我想问一下你最后怎么做的啊
能不能给我详细的方法

楼主,我也在做,不知道具体怎么做,能分享你的方法吗
7楼2015-09-15 17:16:47
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