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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr二聚体很严重
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)

[求助] pcr二聚体很严重 已有2人参与

pcr 都是引物二聚体，特别亮，目的条带没有  各位大神 指点迷津吧  拜托了
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1楼 2017-07-08 09:45:51
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hzau103

新虫 (正式写手)
调整温度 或者 换引物

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3楼2017-07-09 21:37:06
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PattyGao

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-12 23:12:54
提高退火温度试一下，不行的话，就用primestar 两步法去扩
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7楼2017-07-11 10:03:44
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PattyGao

新虫 (小有名气)
当然可以啊，只不过延长68度的时间就行

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10楼2017-07-12 18:52:03
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普通回帖

HZAUAS

新虫 (小有名气)
不可能只有引物二聚体吧，至少你的目的片段也应该阔出来啊

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2楼2017-07-09 19:06:52
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hzau103

新虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by HZAUAS at 2017-07-09 19:06:52
不可能只有引物二聚体吧，至少你的目的片段也应该阔出来啊

华农的？

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4楼2017-07-09 21:37:44
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m情深守护

新虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-12 23:12:16
这个跟引物特异性很大，或者说，加入你的引物没问题的话，你查的基因序列是否有问题，也就是说你的模板是否有问题
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5楼2017-07-10 09:53:18
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stabilized

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-07-12 23:12:39
做个温度梯度试试吧，如果不行，最好重新合成引物。
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坚持！
6楼2017-07-10 10:29:54
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by PattyGao at 2017-07-11 10:03:44
提高退火温度试一下，不行的话，就用primestar 两步法去扩

可是 我的目的片段比较长，2000bp，，用两步法合适吗
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8楼2017-07-11 22:30:32
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王丽媛西西西

银虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by PattyGao at 2017-07-11 10:03:44
提高退火温度试一下，不行的话，就用primestar 两步法去扩

可是 我的目的片段比较长，2000bp，，用两步法合适吗
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9楼2017-07-11 22:30:39
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