24小时热门版块排行榜    

查看: 3468  |  回复: 4

921293056

银虫 (初入文坛)

[求助] 目的片段的大小 已有1人参与

目的片段的大小
各位高手:
大家好,我用别人设计的引物做PCR,可是跑出来的条带差不多是100bp,所以我想请高手帮我查或是比对一下我的引物的扩增片段的大小。
人类肠道柔嫩梭杆菌
柔-F5' cctgcgtgaagtccgaattg3'
R 5'ccttgcggttgaactactgg3'
附上反应条件94度3min预变性,94度变性30秒,52到64度分七管梯度,72度延伸一分钟,30个循环,编号依次随温度增高。琼脂糖凝胶是1.5%的胶
万分感激。。。附上条带
会不会都是引物二聚体,这该怎么办呢?

目的片段的大小


目的片段的大小-1


发自小木虫IOS客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

15978432804

新虫 (小有名气)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-29 08:29:54
你可以试着用一下降落pcr,或是看一下序列是否有特殊结构

发自小木虫Android客户端
2楼2017-05-29 00:31:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

921293056

银虫 (初入文坛)

降落PCR怎么设置,实验室用的是伯乐S1000。

发自小木虫IOS客户端
3楼2017-05-29 13:59:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laolaohutu

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2017-05-30 22:41:09
先确认下要扩增的目的基因片段是多长,如果扩出来的片段和预计片段不符,那么肯定不是你要的!如果预计片段很小,建议选用分子量小一点的Marker,同时增加凝胶的浓度和电泳的时间

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

请享受无法回避的痛苦
4楼2017-05-30 15:20:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

921293056

银虫 (初入文坛)

送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by laolaohutu at 2017-05-30 15:20:57
先确认下要扩增的目的基因片段是多长,如果扩出来的片段和预计片段不符,那么肯定不是你要的!如果预计片段很小,建议选用分子量小一点的Marker,同时增加凝胶的浓度和电泳的时间

因为是找别人帮忙设计的引物序列,现在正在询问中。我又测量了我的DNA模板,发现OD260/OD280=0.75,感觉自己的模板DNA提取也有问题。打算重新再提取一下DNA,再重新开始验证。谢谢了

发自小木虫IOS客户端
5楼2017-05-31 08:08:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 921293056 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:25 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 16:25 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:12 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:00 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:57 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 27秋季材料博士申请求助 10+3 Cahal1 2026-09-11 4/200 2026-09-14 08:50 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上有专家说实验设备不是我们单位的 +6 zj_muchong 2026-09-08 8/400 2026-09-11 06:56 by suifengdao
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
请填处理意见