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小尾巴的小窝

新虫 (初入文坛)

[求助] POD酶测定的问题 已有1人参与

最近在做草莓POD的测定,用的愈创木酚法,测出来的OD值一直不够稳定,一会上下波动,一会持续下降
实验方法如下:酶提取液的制备:从5个草莓果实上取样,称5 g去皮果肉组织,放入预冷的研钵中,加2.5 ml 0.1 mol·L-1 pH6.4磷酸缓冲液(含4% PVP),冰浴研磨,移至10 ml离心管中,再加入2.5 ml缓冲液冲洗研钵并移至离心管,于4 ℃,10000 r·min-1冷冻离心30 min,取上清液测定。采用愈创木酚法,反应体系中加入1 mL酶粗提液,3 mL愈创木酚,0.2 mL 0.5mol/L H2O2混匀,每隔10s记录一次,扫描3 min内OD470的变化值,以每分钟470 nm处吸光值变化0.001为1个酶活力单位(U)。
求大神指教,哪里出了问题
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小尾巴的小窝

新虫 (初入文坛)

2楼2017-03-07 17:35:08
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junifran

新虫 (小有名气)

我们可以测酶活哈,专业技术服务

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3楼2017-03-07 17:42:54
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万冰962464

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

引用回帖:
1楼: Originally posted by 小尾巴的小窝 at 2017-02-23 20:50:45
最近在做草莓POD的测定,用的愈创木酚法,测出来的OD值一直不够稳定,一会上下波动,一会持续下降
实验方法如下:酶提取液的制备:从5个草莓果实上取样,称5 g去皮果肉组织,放入预冷的研钵中,加2.5 ml 0.1 mol· ...

这个是很正常的,如果不波动那就不是酶活了

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4楼2017-03-23 14:18:10
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lsh8665001

新虫 (小有名气)

你愈创木酚用的是什么溶解,因为我做的时候用缓冲液溶,但是愈创木酚是油状液体,用的时候我就摇匀再取,目前结果还可以。

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5楼2017-04-13 07:06:41
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lsh8665001

新虫 (小有名气)

我还想问,你的数据最后是算比酶活还是?

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6楼2017-04-13 07:08:42
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小尾巴的小窝

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by lsh8665001 at 2017-04-13 07:06:41
你愈创木酚用的是什么溶解,因为我做的时候用缓冲液溶,但是愈创木酚是油状液体,用的时候我就摇匀再取,目前结果还可以。

缓冲溶液溶解
7楼2017-05-08 10:37:10
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秦国礼

新虫 (小有名气)

测定时酶液只加了一半,数据还可以用吗

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8楼2018-12-04 16:46:13
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gx61093

新虫 (小有名气)

我做的杏,也是上下波动的,最后还是看整体趋势

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9楼2018-12-05 10:01:13
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