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POD酶测定的问题 已有1人参与
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最近在做草莓POD的测定，用的愈创木酚法，测出来的OD值一直不够稳定，一会上下波动，一会持续下降 实验方法如下：酶提取液的制备：从5个草莓果实上取样，称5 g去皮果肉组织，放入预冷的研钵中，加2.5 ml 0.1 mol·L-1 pH6.4磷酸缓冲液(含4% PVP)，冰浴研磨，移至10 ml离心管中，再加入2.5 ml缓冲液冲洗研钵并移至离心管，于4 ℃，10000 r·min-1冷冻离心30 min，取上清液测定。采用愈创木酚法，反应体系中加入1 mL酶粗提液，3 mL愈创木酚，0.2 mL 0.5mol/L H2O2混匀，每隔10s记录一次，扫描3 min内OD470的变化值，以每分钟470 nm处吸光值变化0.001为1个酶活力单位(U)。 求大神指教，哪里出了问题 |
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