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植物MDA和POD测定问题
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首先POD，我最高浓度处理组的吸光度值升高太快，我30s读一次数，但2min30s的时候数据就已经升到最大了（3.0000），这代表什么？是不是应该少加点酶液？（我只加了20μl）,前面的数据应该还能用吧？ 再说MDA，我问过这个问题了，就是测MDA的时候需不需要加TCA研磨，我也知道加TCA研磨好，但是也有一部分不加的，见过好多，文献，硕士论文，博士论文都有，他们大多都参考林值芳（1984），我想问的是如果我只是想看一下不同处理组MDA的变化趋势，不是非常准确的测定一下MDA的含量，而且有对照做参比，是不是可以不加TCA研磨？直接就取酶液加TBA（里面也含TCA）高温反应后测定。之所以想这么做是因为处理较多，指标较多，要一天测完，样品也不大够用。如果不需要加TCA的话可以和抗氧化酶用同一个酶液，这样只研磨一次，只测一次蛋白，节省好多时间。是否可行请高手指点。 |
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【答案】应助回帖
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1 你可以修改测定系统中添加的样品量，获得结果后按照你之前测定的对应蛋白含量计算即可。对于一般的分光光度计，太大的值并不准确，一般可信范围是0.3-0.8，我自己做实验测定酶活时放宽点，一般也不大于2. 2 加TCA，这样结果比较稳定，重现性和精密度都会比较好。就我看过的几个可信的方法原始报道，还是加TCA的，不要偷懒，想发好文章的话，中文文献报道不可尽信。 |
2楼2012-10-24 17:46:10
