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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 植物MDA和POD测定问题

首先POD,我最高浓度处理组的吸光度值升高太快,我30s读一次数,但2min30s的时候数据就已经升到最大了(3.0000),这代表什么?是不是应该少加点酶液?(我只加了20μl),前面的数据应该还能用吧?
再说MDA,我问过这个问题了,就是测MDA的时候需不需要加TCA研磨,我也知道加TCA研磨好,但是也有一部分不加的,见过好多,文献,硕士论文,博士论文都有,他们大多都参考林值芳(1984),我想问的是如果我只是想看一下不同处理组MDA的变化趋势,不是非常准确的测定一下MDA的含量,而且有对照做参比,是不是可以不加TCA研磨?直接就取酶液加TBA(里面也含TCA)高温反应后测定。之所以想这么做是因为处理较多,指标较多,要一天测完,样品也不大够用。如果不需要加TCA的话可以和抗氧化酶用同一个酶液,这样只研磨一次,只测一次蛋白,节省好多时间。是否可行请高手指点。
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
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starseacow

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyfgood: 金币+10, 。。。很好,很有帮助!楼主,参考交流! 2012-10-24 23:35:23
a71840584: 金币+5, ★★★很有帮助 2012-10-28 18:55:32
1 你可以修改测定系统中添加的样品量,获得结果后按照你之前测定的对应蛋白含量计算即可。对于一般的分光光度计,太大的值并不准确,一般可信范围是0.3-0.8,我自己做实验测定酶活时放宽点,一般也不大于2.
2 加TCA,这样结果比较稳定,重现性和精密度都会比较好。就我看过的几个可信的方法原始报道,还是加TCA的,不要偷懒,想发好文章的话,中文文献报道不可尽信。
植物生理群69993869,为避免广告,申请加入请提供木虫昵称,院校及专业信息
2楼2012-10-24 17:46:10
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