应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 为什么p 不出来？
51/1返回列表
查看: 1593  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么p 不出来？ 已有5人参与

这是两对引物，用LA 酶，taq 酶都不行，给点建议，帮忙帮忙

为什么p 不出来？


为什么p 不出来？-1


为什么p 不出来？-2


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2016-12-21 10:30:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Mr.Peter: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-12-21 15:38:20
用cDNA的话可以把模板多加点，我们刚开始的时候也是扩不出来，后来加了4u的模板才有的。还有退火温度建议设置一个梯度，找到最适合的退火温度。预变性时间可以长一点，我们一般是5-10min

发自小木虫Android客户端
赞一下(2人) 回复此楼
知识就像蒲公英的花儿一样，播种在世界的每一个角落。
9楼2016-12-21 15:14:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答

往生花

至尊木虫 (文坛精英)
降低退火温度试试，楼主应该给出目标片段的大小才对

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
生而必争朝夕，活而必尽善美
2楼2016-12-21 10:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天明鑫8

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Mr.Peter: 金币+2, ★有帮助 2016-12-21 22:38:19
应该是引物设计不合理，看你ugs(Tm)的值偏差有点大，一般最好控制在60摄氏度左右，建议使用Primer3来设计引物；另外，第二个引物的延伸时间适当增长点，增长到3min;
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2016-12-21 10:44:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 往生花 at 2016-12-21 10:40:58
降低退火温度试试，楼主应该给出目标片段的大小才对

是以cDNA 为模板，

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2016-12-21 11:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 21 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭