24小时热门版块排行榜    

查看: 1768  |  回复: 20

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)

[求助] 为什么p 不出来? 已有5人参与

这是两对引物,用LA 酶,taq 酶都不行,给点建议,帮忙帮忙

为什么p 不出来?


为什么p 不出来?-1


为什么p 不出来?-2


发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

wangxue77

禁虫 (初入文坛)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-12-22 07:40:00
本帖内容被屏蔽

7楼2016-12-21 14:15:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

天明鑫8

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Mr.Peter: 金币+2, 有帮助 2016-12-21 22:38:19
应该是引物设计不合理,看你ugs(Tm)的值偏差有点大,一般最好控制在60摄氏度左右,建议使用Primer3来设计引物;另外,第二个引物的延伸时间适当增长点,增长到3min;
3楼2016-12-21 10:44:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sky蒲公英

版主 (文坛精英)

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
Mr.Peter: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-12-21 15:38:20
用cDNA的话可以把模板多加点,我们刚开始的时候也是扩不出来,后来加了4u的模板才有的。还有退火温度建议设置一个梯度,找到最适合的退火温度。预变性时间可以长一点,我们一般是5-10min

发自小木虫Android客户端
知识就像蒲公英的花儿一样,播种在世界的每一个角落。
9楼2016-12-21 15:14:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

往生花

至尊木虫 (文坛精英)

降低退火温度试试,楼主应该给出目标片段的大小才对

发自小木虫Android客户端
生而必争朝夕,活而必尽善美
2楼2016-12-21 10:40:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wenwanhong

新虫 (初入文坛)

11楼2016-12-21 16:18:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 往生花 at 2016-12-21 10:40:58
降低退火温度试试,楼主应该给出目标片段的大小才对

是以cDNA 为模板,

发自小木虫Android客户端
4楼2016-12-21 11:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 往生花 at 2016-12-21 10:40:58
降低退火温度试试,楼主应该给出目标片段的大小才对

目标片段我问问老师,

发自小木虫Android客户端
5楼2016-12-21 11:23:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 往生花 at 2016-12-21 10:40:58
降低退火温度试试,楼主应该给出目标片段的大小才对

一个2144bp 一个快3000

发自小木虫Android客户端
6楼2016-12-21 11:34:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wangxue77

禁虫 (初入文坛)

本帖内容被屏蔽

8楼2016-12-21 14:18:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr.Peter

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by sky蒲公英 at 2016-12-21 15:14:34
用cDNA的话可以把模板多加点,我们刚开始的时候也是扩不出来,后来加了4u的模板才有的。还有退火温度建议设置一个梯度,找到最适合的退火温度。预变性时间可以长一点,我们一般是5-10min
...

谢谢啦

发自小木虫Android客户端
10楼2016-12-21 15:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Mr.Peter 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 4/200 2026-09-14 23:24 by vZfe6xYu34yj
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 3/150 2026-09-14 23:09 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:45 by vZfe6xYu34yj
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 6/300 2026-09-14 22:37 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:25 by vZfe6xYu34yj
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 3/150 2026-09-14 22:24 by vZfe6xYu34yj
[找工作] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:13 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:12 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 5/250 2026-09-14 22:00 by vZfe6xYu34yj
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:36 by vZfe6xYu34yj
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:33 by vZfe6xYu34yj
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 5/250 2026-09-14 21:24 by vZfe6xYu34yj
[考博] 上海工程技术大学激光智能制造课题组招收博士研究生 +4 两三岁ss 2026-09-14 4/200 2026-09-14 20:29 by 班主任的同桌
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[找工作] 浙江师范大学是怎么坑我的 +6 recruit123 2026-09-09 6/300 2026-09-14 12:00 by 萨仁其其格
信息提示
请填处理意见