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zeyuanzi

新虫 (小有名气)

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专业: 生物物理、生物化学与分子

[求助] 连接转化不长菌已有11人参与

昨天我做了4个转化。
1.未加卡那的感受态—长了大量密密麻麻的菌
2.加卡那的感受态—不长
3.加卡那未酶切质粒的感受态—不长
4.加卡那重组克隆感受态—不长
1说明感受态是活的，2说明卡那没失效，3说明质粒没导进去或质粒错误或感受态感受状态不好？
求大神有时间帮我看下

@wizardfan @youlinglyw 发自小木虫Android客户端

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【求助/交流】连接转化长菌有质粒，但是没有目的片段，怎么回事？？已经有20人回复

1楼 2016-10-16 11:50:07

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enjoy大志

铜虫 (小有名气)

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专业: 细胞、亚细胞结构与功能

引用回帖:

8楼: Originally posted by zeyuanzi at 2016-10-16 18:12:16
确定过了，是
...

有可能卡那浓度较高，调整一下浓度试一试。
我想问一下你用的感受态是什么类型的菌？我做TA克隆时用的是自制的DH5α感受态，初步筛选用的是混有Amp和X-gal的平板，倘若你的载体含有Amp表达基因，建议用蓝白斑筛选试一试。

付出定有回报

27楼2016-10-17 11:30:06

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enjoy大志

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【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

肯卡那浓度过高，但也不至于一个单菌落都不长吧，你可以降低卡那浓度试一试。
你的感受态是什么类型菌？我之前做ta克隆用的是dh5α，含有表达基因Amp，则我初步筛选时蓝白斑筛选。

付出定有回报

28楼2016-10-17 11:33:04

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