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沉浮华夏

新虫 (初入文坛)

[交流] 关于镍柱纯化的问题 已有4人参与

小弟最近在做镍柱纯化,最后纯化完之后加0.5M NaOH洗的时候每次柱子都堵,有什么结局办法没
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)


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回收填料?
先用EDTA洗掉镍了?
镍与NaOH反应会生成沉淀的。
2楼2016-10-09 08:43:34
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木木清月月鸟

禁虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
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3楼2016-10-09 08:45:18
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hc-material

专家顾问 (职业作家)

每次都堵只有一个原因,那就是柱子里面有固行物,比如上柱前没过滤掉的细胞碎片,或者非特异吸附的蛋白遇氢氧化钠固化等。这样对柱子的损失很大。建议小柱子上柱前一定要过滤(先离心在0.22或0.45um膜过滤),洗脱后,先用1M咪唑走走,或者2M氯化钠走走,在过氢氧化钠(0.1M)即可。祝顺利。
4楼2016-10-09 13:53:56
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沉浮华夏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 木木清月月鸟 at 2016-10-09 08:45:18
先用高浓度咪唑冲一会儿,再用NaOH洗

就是下柱子的时候吗?
5楼2016-10-09 16:12:41
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沉浮华夏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by hc-material at 2016-10-09 13:53:56
每次都堵只有一个原因,那就是柱子里面有固行物,比如上柱前没过滤掉的细胞碎片,或者非特异吸附的蛋白遇氢氧化钠固化等。这样对柱子的损失很大。建议小柱子上柱前一定要过滤(先离心在0.22或0.45um膜过滤),洗脱后 ...

哦哦,恍然大悟,谢谢回复
6楼2016-10-09 16:14:32
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沉浮华夏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by xuweitao at 2016-10-09 08:43:34
回收填料?
先用EDTA洗掉镍了?
镍与NaOH反应会生成沉淀的。

用EDTA洗掉镍不是属于重生柱子吗?最后不还得用硫酸镍洗?
7楼2016-10-09 16:22:31
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肖颖2009

铁虫 (正式写手)


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引用回帖:
7楼: Originally posted by 沉浮华夏 at 2016-10-09 16:22:31
用EDTA洗掉镍不是属于重生柱子吗?最后不还得用硫酸镍洗?...

如果你的柱料是需要挂镍的,纯化完后就要用EDTA把镍柱上的镍洗掉,等下次纯化的时候再重新挂镍。
8楼2016-10-10 09:32:55
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