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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)

[求助] DNA凝胶电泳问题 已有2人参与

下面是今天跑的胶,测试配合物对pBR322的断裂效果,想问各路大神最右边的为什么没有出现明显条带,可能的原因是什么?样品孔浓度从左至右依次增加。

DNA凝胶电泳问题
6CO{C((H~IFIXB{QPSUEH)G.jpg@biostar2009
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yuy111

银虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:11:56
糊里糊涂...: 金币+15, 有帮助 2016-09-09 10:22:47
cannot for sure if it is  double digestions?
4楼2016-09-09 02:36:08
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普通回帖

kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:11:41
糊里糊涂...: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-09-09 10:23:50
看着怎么感觉样品浓度是从右至左依次增加呢?是不是胶放反了呢??

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坚持到底就是胜利!
2楼2016-09-08 10:39:43
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)

送红花一朵
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:11:50
引用回帖:
2楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 10:39:43
看着怎么感觉样品浓度是从右至左依次增加呢?是不是胶放反了呢??

胶确定是没有放反的

发自小木虫Android客户端
3楼2016-09-09 00:00:09
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:12:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by 糊里糊涂... at 2016-09-09 00:00:09
胶确定是没有放反的
...

嗯嗯,那你溶解pBR322的溶剂是什么?会不会高浓度时,其中的某些离子抑制了配合物的断裂作用呢?
坚持到底就是胜利!
5楼2016-09-09 08:18:54
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-09 08:18:54
嗯嗯,那你溶解pBR322的溶剂是什么?会不会高浓度时,其中的某些离子抑制了配合物的断裂作用呢?...

pBR322是买的,不过如果浓度过高的话我们是用pBR322储存液进行稀释的。
6楼2016-09-09 09:47:33
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-09 02:36:08
cannot for sure if it is  double digestions?

如果是这样的话,不应该出现FormⅢ条带吗?
7楼2016-09-09 09:51:12
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 糊里糊涂... at 2016-09-09 09:47:33
pBR322是买的,不过如果浓度过高的话我们是用pBR322储存液进行稀释的。...

储存液中的成分你们知道吗?
坚持到底就是胜利!
8楼2016-09-09 09:53:09
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-09 09:53:09
储存液中的成分你们知道吗?...

是用tris和Na2EDTA配的,这会有什么影响吗?
9楼2016-09-09 10:25:48
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 糊里糊涂... at 2016-09-09 10:25:48
是用tris和Na2EDTA配的,这会有什么影响吗?...

当然有影响了啊,EDTA是螯合剂,极可能会抑制酶的活性,只是我不知道在这里对于配合物作用的发挥是否有影响的,建议你查下文献看下。

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坚持到底就是胜利!
10楼2016-09-09 13:19:52
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