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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » DNA凝胶电泳问题
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)

[求助] DNA凝胶电泳问题 已有2人参与

下面是今天跑的胶，测试配合物对pBR322的断裂效果，想问各路大神最右边的为什么没有出现明显条带，可能的原因是什么？样品孔浓度从左至右依次增加。

DNA凝胶电泳问题
6CO{C((H~IFIXB{QPSUEH)G.jpg@biostar2009
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1楼 2016-09-07 16:48:43
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yuy111

银虫 (正式写手)

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★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:11:56
糊里糊涂...: 金币+15, ★有帮助 2016-09-09 10:22:47
cannot for sure if it is  double digestions?
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4楼2016-09-09 02:36:08
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xn8008: 金币+1, 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:11:41
糊里糊涂...: 金币+20, ★★★很有帮助 2016-09-09 10:23:50
看着怎么感觉样品浓度是从右至左依次增加呢？是不是胶放反了呢？？
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糊里糊涂...
坚持到底就是胜利！
2楼2016-09-08 10:39:43
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)
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xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:11:50
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2楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-08 10:39:43
看着怎么感觉样品浓度是从右至左依次增加呢？是不是胶放反了呢？？

胶确定是没有放反的

发自小木虫Android客户端
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3楼2016-09-09 00:00:09
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
xn8008: 欢迎发帖交流 2016-09-09 09:12:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by 糊里糊涂... at 2016-09-09 00:00:09
胶确定是没有放反的
...

嗯嗯，那你溶解pBR322的溶剂是什么？会不会高浓度时，其中的某些离子抑制了配合物的断裂作用呢？
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坚持到底就是胜利！
5楼2016-09-09 08:18:54
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-09 08:18:54
嗯嗯，那你溶解pBR322的溶剂是什么？会不会高浓度时，其中的某些离子抑制了配合物的断裂作用呢？...

pBR322是买的，不过如果浓度过高的话我们是用pBR322储存液进行稀释的。
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6楼2016-09-09 09:47:33
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by yuy111 at 2016-09-09 02:36:08
cannot for sure if it is  double digestions?

如果是这样的话，不应该出现FormⅢ条带吗？
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7楼2016-09-09 09:51:12
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 糊里糊涂... at 2016-09-09 09:47:33
pBR322是买的，不过如果浓度过高的话我们是用pBR322储存液进行稀释的。...

储存液中的成分你们知道吗？
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坚持到底就是胜利！
8楼2016-09-09 09:53:09
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糊里糊涂...

银虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by kuaile5420 at 2016-09-09 09:53:09
储存液中的成分你们知道吗？...

是用tris和Na2EDTA配的，这会有什么影响吗？
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9楼2016-09-09 10:25:48
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kuaile5420

专家顾问 (著名写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by 糊里糊涂... at 2016-09-09 10:25:48
是用tris和Na2EDTA配的，这会有什么影响吗？...

当然有影响了啊，EDTA是螯合剂，极可能会抑制酶的活性，只是我不知道在这里对于配合物作用的发挥是否有影响的，建议你查下文献看下。
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糊里糊涂...
坚持到底就是胜利！
10楼2016-09-09 13:19:52
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