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老婆-嘻嘻

新虫 (小有名气)

[交流] western blot交流

我做完曝光为什么一个条带都没有？
电泳80V两小时，转膜110v90分钟，封闭90分钟，一抗过夜，二抗室温一小时，这步骤有什么问题吗？请大神指教！

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1楼 2016-07-03 11:31:37
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mizhimao

木虫 (小有名气)
★
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嗯，可以试试楼上的方法，用丽春红染，看看有没有转上去
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且举世而誉之而不加劝，举世而非之而不加沮。
5楼2016-07-04 16:49:16
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普通回帖

51mimi

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
平行跑一个Sd S，看是什么情况。确定的蛋白大小，用适合的膜，也有孔径大小的，转膜上专用的maker 不禁能知道蛋白位置便于剪，还能知道转膜是否成功

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2楼2016-07-03 23:45:14
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水逝雁南飞

新虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
Western-Blot中间有一个问题条带都显示不出来的，转完膜之后用丽春红染过没？有木有转到膜？
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3楼2016-07-04 10:54:18
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lhs8625

铁杆木虫 (知名作家)
祝福楼主祝福多多
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4楼2016-07-04 11:28:04
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小瑜蛋24

新虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
抗体有没有问题？

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6楼2016-07-04 20:19:19
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xiangruikong

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请教个问题，WB新手，我的植物源蛋白没有现成的抗体，怎么设计WB?谢谢

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7楼2016-07-04 21:36:43
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诸葛小汐

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by xiangruikong at 2016-07-04 21:36:43
请教个问题，WB新手，我的植物源蛋白没有现成的抗体，怎么设计WB?谢谢

可以考虑去定做抗体 或者做表位tag

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8楼2016-07-05 09:58:51
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xiangruikong

木虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 诸葛小汐 at 2016-07-05 09:58:51
可以考虑去定做抗体 或者做表位tag
...

谢谢

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9楼2016-07-05 19:53:34
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star013

新虫 (知名作家)
我们可以做wb技术服务

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10楼2016-07-06 08:29:36
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