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jingxialai新虫 (初入文坛)
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[求助]
做了好久的实验PCR一直没有结果，不知道问题出在哪了？？ 已有6人参与
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PCR反应条件：98度预变性2min，94度15秒，退火温度做了梯度中间四孔的温度依次为：57度、59度、60.2度、62.6度，15秒，72度1min，总共30个循环，左右两边为DL5000和DL2000，目的条带为1355bp,可是胶却是这个样子，谢谢大家给点建议！！ IMGP5786_meitu_1_meitu_1.jpg |
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jingxialai
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2楼2016-06-26 17:51:16
mlxmiao
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【答案】应助回帖
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1.引物多设计几条，可以用在线软件（如下）。 2.72度1分钟，时间不够，1335bp的约要90秒，一般酶是1kb/min（特殊酶除外） http://www.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer http://primer3plus.com/cgi-bin/dev/primer3plus.cgi http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/ 发自小木虫Android客户端 |
3楼2016-06-26 20:17:56
mlxmiao
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4楼2016-06-27 07:45:53
