24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2687  |  回复: 17
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

jingxialai

新虫 (初入文坛)

[求助] 做了好久的实验PCR一直没有结果,不知道问题出在哪了?? 已有6人参与

PCR反应条件:98度预变性2min,94度15秒,退火温度做了梯度中间四孔的温度依次为:57度、59度、60.2度、62.6度,15秒,72度1min,总共30个循环,左右两边为DL5000和DL2000,目的条带为1355bp,可是胶却是这个样子,谢谢大家给点建议!!

做了好久的实验PCR一直没有结果,不知道问题出在哪了??
IMGP5786_meitu_1_meitu_1.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

18986641153

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
虽然你的目的片断扩出来特异性不好,但是你还是可以做切胶回收和TA克隆,应该还可以做出来的!

发自小木虫Android客户端
做人,做事,做学问!!!
5楼2016-06-27 09:57:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

永远一片天

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-06-27 07:43:07
xn8008: 应助指数+1 2016-06-27 08:07:58
jingxialai: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-06-27 13:40:31
你这种情况有两种,第一,引物不好,非特异性带强烈,建议更换引物。第二,膜板不好,有可能你的基因组降解,或者杂质太多,这种情况建议重新提取基因组,并且最好用TE缓冲液保存,不要用纯水,基因组很容易降解,你的基因组中可能混有其它基因组。
2楼2016-06-26 17:51:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2016-06-27 07:43:32
xn8008: 应助指数+1 2016-06-27 08:08:03
jingxialai: 金币+1, 有帮助 2016-06-27 13:50:24
1.引物多设计几条,可以用在线软件(如下)。
2.72度1分钟,时间不够,1335bp的约要90秒,一般酶是1kb/min(特殊酶除外)
http://www.yeastgenome.org/cgi-bin/web-primer

http://primer3plus.com/cgi-bin/dev/primer3plus.cgi

http://www.ncbi.nlm.nih.gov/tools/primer-blast/

发自小木虫Android客户端
3楼2016-06-26 20:17:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mlxmiao

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

还有一条,30循环可能太少了,

发自小木虫Android客户端
4楼2016-06-27 07:45:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 302求调剂 +9 zyx上岸! 2026-04-02 9/450 2026-04-02 23:07 by 马儿快快地跑
[考研] 求调剂 +5 朔朔话 2026-04-02 6/300 2026-04-02 22:02 by barlinike
[考研] 0856材料与化工调剂,339 +14 10213207 2026-03-31 14/700 2026-04-02 21:01 by 1104338198
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 6/300 2026-04-02 15:49 by liumengping
[考研] 282求调剂 +13 呼吸都是减肥 2026-04-01 13/650 2026-04-02 14:10 by baoball
[考研] 348求调剂 +6 吴彦祖24k 2026-04-02 6/300 2026-04-02 14:07 by 给你你注意休息
[考研] 262求调剂 +5 励志一定发文章 2026-04-02 6/300 2026-04-02 12:51 by yulian1987
[考研] 266分,一志愿电气工程,本科材料,求材料专业调剂 +10 哇呼哼呼哼 2026-04-01 11/550 2026-04-02 11:31 by lnilvy
[考研] 289求调剂 +23 新时代材料 2026-03-27 26/1300 2026-04-02 10:29 by oooqiao
[考研] 085410 一志愿211 22408分数359求调剂 +3 123456789qw 2026-03-31 4/200 2026-04-02 00:06 by 义文wang
[考研] 296求调剂 +4 汪!?! 2026-03-31 7/350 2026-04-01 22:04 by 客尔美德
[考研] 建环,能源,土木老师路过看一看!!! +4 嘿嘿uu 2026-04-01 4/200 2026-04-01 20:42 by 无懈可击111
[考研] 材料专业调剂 +5 啦啦啦哭 2026-03-31 6/300 2026-04-01 16:48 by JourneyLucky
[考研] 352分-085602-一志愿985 +6 海纳百川Ly 2026-03-29 6/300 2026-03-31 21:06 by yuq
[考研] 材料科学与工程求调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-29 13/650 2026-03-31 19:50 by Dyhoer
[考研] 调剂求院校招收 +7 鹤鲸鸽 2026-03-28 7/350 2026-03-31 11:21 by oooqiao
[考研] 262求调剂 +7 ZZ..000 2026-03-30 8/400 2026-03-31 10:05 by cal0306
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-29 9/450 2026-03-30 21:02 by dophin1985
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
信息提示
请填处理意见