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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » DNA提取的后的保存使用问题
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shangna

新虫 (初入文坛)

[求助] DNA提取的后的保存使用问题 已有1人参与

ctab法提取的植物基因组DNA，检测后纯度不错，用30ul的无菌水保存在-20℃，有以下问题请帮我回答一下，谢谢：
1.两天之内一共冻融了四次取DNA做SSR pcr用，每次放室温的时间大概两个小时，请问DNA会不会大量分解影响pcr结果
2.-20取出后将不同DNA混合做SSR pcr，为了混合均匀用枪头吹打了几次，会不会使DNA链断裂影响后续pcr实验。

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1楼 2016-05-18 17:30:45
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
为什么不分装

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2楼2016-05-18 18:35:21
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shangna

新虫 (初入文坛)
因为是菜鸟，不懂

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3楼2016-05-18 20:12:11
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shangna

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 1135482512 at 2016-05-18 18:35:21
为什么不分装

因为是菜鸟，不懂

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4楼2016-05-18 20:14:53
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1135482512

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by shangna at 2016-05-18 20:14:53
因为是菜鸟，不懂
...

反复冻融容易降解，你可以再次检验一下质量

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5楼2016-05-18 20:27:42
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cencheng

新虫 (小有名气)
分装比较好！

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6楼2016-05-18 22:13:07
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mexy2008

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

DNA比你想象的坚强，放心吧！如果不超过一个月，可以放4度保存，亲测无碍。
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7楼2016-07-04 15:45:20
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jackyoung

新虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by mexy2008 at 2016-07-04 15:45:20
DNA比你想象的坚强，放心吧！如果不超过一个月，可以放4度保存，亲测无碍。

ssr的话一般扩增长度比较短，DNA降解的只要不是特别厉害都能扩增出来，但反复冻融本身不好，长期四度也不好(不信的扩增个2kb以上的片段试试，效果立竿见影)，建议适当分装，尽量减少室温时间（置于冰上）。希望有用

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CestLaVie
8楼2016-07-05 08:31:35
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