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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 跑胶出现这种情况请问怎么回事？
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sxxuan

金虫 (著名写手)

[求助] 跑胶出现这种情况请问怎么回事？ 已有2人参与

各位大神，最近跑胶都出现下面这种情况，求助，用的是1×TBE，样本是PCR纯化产物

跑胶出现这种情况请问怎么回事？
1.jpg


跑胶出现这种情况请问怎么回事？-1
2.jpg


跑胶出现这种情况请问怎么回事？-2
3.jpg
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你的日子如何，你的力量也必如何！
1楼 2016-05-17 15:44:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

瘸腿老马

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxxuan: 金币+3, ★★★很有帮助 2016-05-19 10:39:18
最可能的原因是胶没完全溶解，常常是加热时间不够或是胶的质量有问题。也有可能loading buffer 不对。
另：
1，梳子可能太老了或／和倒胶时温度太低了，胶坝太大了。
2，拔梳子太粗暴，加样孔有破坏
2，加样太多，太多样品溢出了
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10楼2016-05-19 10:35:07
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鹿的猫123

新虫 (初入文坛)
电泳液没覆盖过孔，我跑过这种很诡异的火箭样的图

发自小木虫Android客户端
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29楼2016-05-20 21:45:02
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fengshen2005

银虫 (正式写手)
我遇到过好几次这种情况，都是因为点样时胶孔没有被缓冲液浸没，建议多加点缓冲液

发自小木虫Android客户端
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30楼2016-05-20 22:29:12
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普通回帖

落雪6

铁杆木虫 (正式写手)

小兵
琼脂糖合适吗？

发自小木虫Android客户端
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2楼2016-05-17 17:27:19
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liuyuxue

铁杆木虫 (小有名气)
胶没倒好
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花落人亡两不知
3楼2016-05-17 21:40:57
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拟南芥小保姆

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
sxxuan: 金币+2, ★★★很有帮助 2016-05-18 11:25:27
倒胶有问题，不过也有可能是电泳缓冲液的问题，电泳液用的时间过长或者是倒胶用的缓冲液和电泳液不是一种
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4楼2016-05-18 10:33:14
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 落雪6 at 2016-05-17 17:27:19
琼脂糖合适吗？

1%的胶
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你的日子如何，你的力量也必如何！
5楼2016-05-18 11:23:14
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by liuyuxue at 2016-05-17 21:40:57
胶没倒好

怎么没有倒好法？是否好像楼下讲的那样配胶的buffer和跑胶的不一样？
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你的日子如何，你的力量也必如何！
6楼2016-05-18 11:23:51
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 拟南芥小保姆 at 2016-05-18 10:33:14
倒胶有问题，不过也有可能是电泳缓冲液的问题，电泳液用的时间过长或者是倒胶用的缓冲液和电泳液不是一种

都是用1×TAE，但可能配完一次后，倒在电泳槽里的，和配胶的稀释批次不一样，因为没有了就会拿母液再稀释
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你的日子如何，你的力量也必如何！
7楼2016-05-18 11:25:01
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2016-li

新虫 (初入文坛)
核酸染料有没有问题，我同学前段时间也出现类似的情况，影响条件挨个换着看看

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8楼2016-05-19 08:22:50
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sxxuan

金虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 2016-li at 2016-05-19 08:22:50
核酸染料有没有问题，我同学前段时间也出现类似的情况，影响条件挨个换着看看

那最后你的同学找出原因了吗？
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你的日子如何，你的力量也必如何！
9楼2016-05-19 09:12:33
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