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darlingbear

新虫 (小有名气)

[求助] 做Western时,小分子蛋白转膜时间太久了会怎样? 已有4人参与

我要检测的蛋白大小是14kD,转膜用的200mA恒流,110分钟,结果条带很不明显,是不是转膜时间久了?

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段李晓彤

银虫 (正式写手)

院士虫


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-05-17 07:48:58
我的21k,300毫安20分钟,200毫安我觉得四十分钟我算多了

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» 本帖已获得的红花(最新10朵)

4楼2016-05-17 06:55:11
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kaobo2012

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-05-17 07:48:23
看膜的孔径,如果蛋白比孔径大,转膜时间久了一般没有什么问题,比孔径小,就要把握下转膜条件。
2楼2016-05-16 23:05:18
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段李晓彤

银虫 (正式写手)

院士虫

3楼2016-05-17 06:52:36
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darlingbear

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by kaobo2012 at 2016-05-16 23:05:18
看膜的孔径,如果蛋白比孔径大,转膜时间久了一般没有什么问题,比孔径小,就要把握下转膜条件。

我用的是NC膜,转膜后15kD的marker还是很明显的,就是目的蛋白看不到

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5楼2016-05-17 08:44:46
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