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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » qPCR 相对定量
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qian0717

新虫 (小有名气)

[求助] qPCR 相对定量 已有1人参与

如果我有CK、T1、T2、T3、…、T20一共20个样本，要测20个目的基因，是应该把同一样品放在一个板子上跑，还是把同一个基因放在一个板子上跑？

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1楼 2016-05-12 16:43:53
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
qian0717: 金币+10 2016-05-15 15:20:05
同一个基因吧，这样可以消除不同基因退火温度的影响。不过问题都不是太大。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2016-05-12 16:56:24
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qian0717

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wangranjun at 2016-05-12 16:56:24
同一个基因吧，这样可以消除不同基因退火温度的影响。不过问题都不是太大。

谢谢
那么如果退火温度一致，怎么p都行吗？
如果用-2△△CT法，目的基因和内参每次都要一起p吗？

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3楼2016-05-13 00:24:55
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主
引用回帖:
3楼: Originally posted by qian0717 at 2016-05-13 00:24:55
谢谢
那么如果退火温度一致，怎么p都行吗？
如果用-2△△CT法，目的基因和内参每次都要一起p吗？
...

绝对定量的话内参和对照每次都是需要的。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
4楼2016-05-13 10:30:41
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qian0717

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by wangranjun at 2016-05-13 10:30:41
绝对定量的话内参和对照每次都是需要的。...

那用-2△△CT相对定量，目的基因和内参要一起跑么

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5楼2016-05-15 15:23:12
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by qian0717 at 2016-05-15 15:23:12
那用-2△△CT相对定量，目的基因和内参要一起跑么
...

我们每次都是一起的，这样分析起来方便一些。
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
6楼2016-05-15 15:59:19
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杨仔儿

木虫 (著名写手)
你好，请教你一个问题，探针法q-pcr中，探针3‘端有淬灭集团，我最近找公司合成的探针我要求3’端为MGB基团，但是他合成的是BHQ基团，我问公司，他们说只是每个公司的叫法不一样，原料是一样的，你这方面了解吗？
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7楼2016-05-31 16:07:06
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