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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 感受态细胞制备问题 已有7人参与

氯化钙法制备感受态细胞最后需要分装,因为需要冰上分装,但是冰上分装又容易污染感受态细胞,分装感受态细胞的时候有什么好方法?
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biocherry

铁虫 (正式写手)

2楼2016-03-28 18:20:57
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许欧阳紫儿

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
分装就在超净工作台下冰上操作就行啊!

发自小木虫Android客户端
3楼2016-03-29 10:34:55
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
原则,越冷越好,越干净越好,用具提前低温冰箱放置,该灭菌灭菌,操作时超净台冰盒上分装,分装完立刻投掷入一盛液氮泡沫盒,到一定数量收集入袋,超级好,负八十度冰箱存放。我说的就是全部标准流程,根据自身条件可以适当调整,别忘了两句原则

发自小木虫IOS客户端
4楼2016-03-29 10:42:24
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jackie在努力

新虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
我们实验室用的Takara的大肠杆菌感受态制备试剂盒,最后一步在分装的时候其实并未放在冰上,效果也很好。如果非要放在冰上我建议用楼上的建议,放在冰盒上面
5楼2016-03-29 16:02:04
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zyfskj

新虫 (著名写手)

向我乞求怜悯吧,我会狠狠拒绝的。
6楼2016-03-29 19:33:10
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馨-馨

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
冰盒上进行分装...
7楼2016-03-30 22:35:42
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wanglei512

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
提前把灭好菌的塑料板、离心管放和枪头放到-80冰箱冷冻,稀释好的感受态细胞放冰里, 都准备好后快速分装。或者把塑料板放到冰上,然后放离心管分装。不过说句实在话,只要操作小心一点,污染可以完全避免,况且转化后都是抗性筛选。所以污染问题不是问题,主要你的感受态转化效率如何,这才是关键。
8楼2016-03-31 10:17:41
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