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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 感受态细胞制备问题
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i760912798

木虫 (正式写手)

[交流] 感受态细胞制备问题 已有7人参与

氯化钙法制备感受态细胞最后需要分装，因为需要冰上分装，但是冰上分装又容易污染感受态细胞，分装感受态细胞的时候有什么好方法？
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1楼 2016-03-28 17:19:16
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biocherry

铁虫 (正式写手)
就在冰上分装的

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2楼2016-03-28 18:20:57
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许欧阳紫儿

新虫 (初入文坛)
★
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分装就在超净工作台下冰上操作就行啊！

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3楼2016-03-29 10:34:55
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神
★
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原则，越冷越好，越干净越好，用具提前低温冰箱放置，该灭菌灭菌，操作时超净台冰盒上分装，分装完立刻投掷入一盛液氮泡沫盒，到一定数量收集入袋，超级好，负八十度冰箱存放。我说的就是全部标准流程，根据自身条件可以适当调整，别忘了两句原则

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4楼2016-03-29 10:42:24
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jackie在努力

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们实验室用的Takara的大肠杆菌感受态制备试剂盒，最后一步在分装的时候其实并未放在冰上，效果也很好。如果非要放在冰上我建议用楼上的建议，放在冰盒上面
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5楼2016-03-29 16:02:04
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zyfskj

新虫 (著名写手)
4楼说的不错

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向我乞求怜悯吧，我会狠狠拒绝的。
6楼2016-03-29 19:33:10
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馨-馨

银虫 (小有名气)
★
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冰盒上进行分装...
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7楼2016-03-30 22:35:42
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wanglei512

金虫 (正式写手)
★
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提前把灭好菌的塑料板、离心管放和枪头放到-80冰箱冷冻，稀释好的感受态细胞放冰里， 都准备好后快速分装。或者把塑料板放到冰上，然后放离心管分装。不过说句实在话，只要操作小心一点，污染可以完全避免，况且转化后都是抗性筛选。所以污染问题不是问题，主要你的感受态转化效率如何，这才是关键。
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8楼2016-03-31 10:17:41
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