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分类 共搜索到 717 个相关话题(最多显示前5000个) 作者 最后发表
考研 生物学308分求调剂(一志愿华东师大)
成功构建4个pet28a-p1系列重组质粒(4)经iptg诱导后超声破碎、sds-page检测、his标签镍柱亲和纯化,获得高纯度聚酮骨架合成酶掌握技术:dna/rna/蛋白质提娶转化、pcr、qpcr、page凝胶电泳...
相信必会光芒万 2026-04-15 04:49
考研 生物学308分求调剂接受跨专业(一志愿华东师大)
成功构建4个pet28a-p1系列重组质粒(4)经iptg诱导后超声破碎、sds-page检测、his标签镍柱亲和纯化,获得高纯度聚酮骨架合成酶掌握技术:dna/rna/蛋白质提娶转化、pcr、qpcr、page凝胶电泳...
相信必会光芒万 2026-04-14 01:06
微生物 纯化表达
我是做β半乳糖苷酶的纯化,我的蛋白是109.9kad二聚体,加完iptg后16℃诱导16h,然后用20mm,50mm,100mm咪唑洗杂,用250mm咪唑洗下目的蛋白,也跑sds-page验证了,但是比酶活很低只有0.3u/...
无学论hh 2026-04-08 03:55
考研 男生,一志愿沪9生物学071000,初试308求调剂
成功构建4个pet28a-p1系列重组质粒(4)经iptg诱导后超声破碎、sds-page检测、his标签镍柱亲和纯化,获得高纯度聚酮骨架合成酶掌握技术:dna/rna/蛋白质提娶转化、pcr、qpcr、page凝胶电泳...
刘墨墨 2026-04-04 02:54
考研 男生,一志愿沪9生物学071000,初试308求调剂
成功构建4个pet28a-p1系列重组质粒(4)经iptg诱导后超声破碎、sds-page检测、his标签镍柱亲和纯化,获得高纯度聚酮骨架合成酶掌握技术:dna/rna/蛋白质提娶转化、pcr、qpcr、page凝胶电泳...
刘墨墨 2026-04-03 02:27
硕博家园 博一被送出联培感觉不适应怎么办
然后我把pET28a换到BL21(DE3),又把自诱导换成IPTG诱导,这才有了表达。这浪费了很多时间,感觉他们不是很上心,但又一直催我。现在的状态就是早上9点钟多10分来,晚上出去一看都1点半了,...
全村的狗 2026-03-31 03:38
微生物 配制好的IPTG溶液如何避光保存
如题,各位大虾,除菌过滤后的IPTG溶液,如何避光保存在呢?包锡箔纸吗
appreciate20 2025-12-05 05:10
微生物 有做双链RNA的吗
用大肠发酵表达双链RNA,将葡萄糖换成甘油做碳源,添加蛋白胨和酵母粉后,IPTG诱导不表达,有大神知道怎么回事吗?之前培养基为无机盐加葡萄糖,氨水作为氮源。
appreciate20 2025-10-29 04:43
生物科学 α-银环蛇毒素的合成与表达、相关研究案例
研究人员曾得到14种mRNA序列,并将其中一种新的α-银环蛇毒素基因亚克隆到原核表达载体pQE30a和pGEX-4T-1中,在大肠杆菌中通过IPTG诱导表达。其中带有GST融合蛋白的重组质粒α-BgTX(P22-A31...
丰度Bio君 2025-06-19 06:49
微生物 BL21大肠杆菌蛋白表达
分别加入IPTG使浓度0.2mM、0.4mM、0.6mM,培养过夜,测od600nm,数值没有对照高,这是什么情况?
橘子味味味儿 2025-05-27 12:00
休闲灌水 BL21大肠杆菌蛋白表达
分别加入IPTG使浓度0.2mM、0.4mM、0.6mM,培养过夜,测od600nm,数值没有对照高,这是什么情况?
橘子味味味儿 2025-05-27 01:32
微生物 各位大神,求助大肠杆菌发酵补料C/N比,诱导后什么时候开始补料...
大肠杆菌(工程菌)发酵:10L罐发酵,配料5L,OD600值10左右开始IPTG诱导(4h左右),3h溶氧开始反弹补糖,诱导后开始补氮源(蛋白胨,酵母膏);糖联动DO,氮源匀速补料,24h放罐。问题:1....
fengyue518 2024-09-21 08:18
分子生物 大肠杆菌原核表达,破碎后目的蛋白看不到了
我们在E.coliBL21(DE3)中做目的基因的克隆表达,过程是:OD值0.8左右加入IPTG(终浓度0.5mM),25℃诱导24h后取2mL离心取沉淀,加100μLPBS和50μL上样液煮沸10min,取30μL跑SDS-PAGE。...
望风止水 2024-09-05 03:57
微生物 M9培养基在使用过程中出现沉淀
谢谢大家~拜托拜托求大神指点下呢M9最小培养基(pH7.0)每升含有6.8克Na2HPO4·7H2O,3克KH2PO40.5克NaCl2克NH4Cl4.2克NaHCO30.8克MgSO4·7H2O0.24克IPTG0.05克乙二胺四乙酸(EDTA)0.002克...
朱六六6 2024-05-13 12:36
生物科学 干货分享|你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
图片微生物培养常用溶液在微生物培养中,LB培养基当属最常见的,另外还有Ampicillin可用于筛选抗性菌,IPTG一般用于蓝白斑筛选,而X-Gal作为β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于β-半乳糖苷酶...
科研战神·王 2024-05-09 05:54
医学 原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果
2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的试管中,37℃220rpm振摇过夜;2.2.2次日按1:100接种于50μg/mlKan的30mlLB培养液中,37℃220rpm...
超困困狗g 2024-05-06 06:00
医学 你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
图片微生物培养常用溶液在微生物培养中,LB培养基当属最常见的,另外还有Ampicillin可用于筛选抗性菌,IPTG一般用于蓝白斑筛选,而X-Gal作为β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于β-半乳糖苷酶...
医学验证123 2024-04-19 05:17
分子生物 干货分享|你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
在微生物培养中,LB培养基当属最常见的,另外还有Ampicillin可用于筛选抗性菌,IPTG一般用于蓝白斑筛选,而X-Gal作为β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于β-半乳糖苷酶原位染色检测及蓝白斑筛...
科研顾问_Gu 2024-04-17 12:42
生物科学 实验技能分享|载体构建及原核表达
待OD600=0.6-0.8时,取1mL菌液作为未诱导全菌样品对比,并向剩余菌液中加入终浓度为0.5mM的IPTG,置于摇床上低温180rpm诱导过夜。3.3超声破碎菌液a.从过夜诱导后的菌液中取1mL作为诱导后全...
科研狗的日常吖 2024-02-29 10:00
分子生物 原核表达诱导不出来,6月份还能诱导出来,同样的条件现在诱导不...
我重新连接转化按原步骤重新构建了质粒,也是测序正确诱导不出来啊啊啊啊啊啊我诱导条件:37℃180r过夜诱导iptg浓度0.1mM-2mM设了5个梯度,没一个出来的或者我16或25℃诱导试试?我接下来要...
出被窝 2023-11-02 04:13
硕博家园 大肠杆菌克隆表达外源基因的大佬看过来
最近做了几十个基因,利用pet-28a在大肠杆菌bl21中表达。几乎都是包涵体,绝大多数菌体破碎后仍浑浊。想请教几个问题1.破碎后菌体仍浑浊是因为包涵体的存在吗?...补充:IPTG0.2mM,20度诱导24h
Zhaoqiong1 2023-09-15 12:43
生物科学 手把手教你做“蛋白纯化”
3、小诱导摸索最佳诱导条件:将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中,37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8,加入不同浓度IPTG(0.1-1mM),不同温度下诱导,随着温度降低,诱导时间延长,如37℃诱导...
科研小努力 2023-08-23 05:07
分子生物 原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果
2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的试管中,37℃220rpm振摇过夜;2.2.2次日按1:100接种于50μg/mlKan的30mlLB培养液中,37℃220rpm...
百事可爱66 2023-08-15 08:14
生物科学 蛋白纯化的步骤
3、小诱导摸索最佳诱导条件:将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中,37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8,加入不同浓度IPTG(0.1-1mM),不同温度下诱导,随着温度降低,诱导时间延长,如37℃诱导...
科研小努力 2023-08-15 05:23
生物科学 原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果
2.2IPTG诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的试管中,37℃220rpm振摇过夜;2.2.2次日按1:100接种于50μg/mlKan的30mlLB培养液中,37℃220rpm...
科研小努力 2023-08-09 03:02