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最后发表
微生物
配制好的
IPTG
溶液如何避光保存
如题,各位大虾,除菌过滤后的
IPTG
溶液,如何避光保存在呢?包锡箔纸吗
appreciate20
2025-12-05 05:10
微生物
有做双链RNA的吗
用大肠发酵表达双链RNA,将葡萄糖换成甘油做碳源,添加蛋白胨和酵母粉后,
IPTG
诱导不表达,有大神知道怎么回事吗?之前培养基为无机盐加葡萄糖,氨水作为氮源。
appreciate20
2025-10-29 04:43
生物科学
α-银环蛇毒素的合成与表达、相关研究案例
研究人员曾得到14种mRNA序列,并将其中一种新的α-银环蛇毒素基因亚克隆到原核表达载体pQE30a和pGEX-4T-1中,在大肠杆菌中通过
IPTG
诱导表达。其中带有GST融合蛋白的重组质粒α-BgTX(P22-A31...
丰度Bio君
2025-06-19 06:49
微生物
BL21大肠杆菌蛋白表达
分别加入
IPTG
使浓度0.2mM、0.4mM、0.6mM,培养过夜,测od600nm,数值没有对照高,这是什么情况?
橘子味味味儿
2025-05-27 12:00
休闲灌水
BL21大肠杆菌蛋白表达
分别加入
IPTG
使浓度0.2mM、0.4mM、0.6mM,培养过夜,测od600nm,数值没有对照高,这是什么情况?
橘子味味味儿
2025-05-27 01:32
微生物
各位大神,求助大肠杆菌发酵补料C/N比,诱导后什么时候开始补料...
大肠杆菌(工程菌)发酵:10L罐发酵,配料5L,OD600值10左右开始
IPTG
诱导(4h左右),3h溶氧开始反弹补糖,诱导后开始补氮源(蛋白胨,酵母膏);糖联动DO,氮源匀速补料,24h放罐。问题:1....
fengyue518
2024-09-21 08:18
分子生物
大肠杆菌原核表达,破碎后目的蛋白看不到了
我们在E.coliBL21(DE3)中做目的基因的克隆表达,过程是:OD值0.8左右加入
IPTG
(终浓度0.5mM),25℃诱导24h后取2mL离心取沉淀,加100μLPBS和50μL上样液煮沸10min,取30μL跑SDS-PAGE。...
望风止水
2024-09-05 03:57
微生物
M9培养基在使用过程中出现沉淀
谢谢大家~拜托拜托求大神指点下呢M9最小培养基(pH7.0)每升含有6.8克Na2HPO4·7H2O,3克KH2PO40.5克NaCl2克NH4Cl4.2克NaHCO30.8克MgSO4·7H2O0.24克
IPTG
0.05克乙二胺四乙酸(EDTA)0.002克...
朱六六6
2024-05-13 12:36
生物科学
干货分享|你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
图片微生物培养常用溶液在微生物培养中,LB培养基当属最常见的,另外还有Ampicillin可用于筛选抗性菌,
IPTG
一般用于蓝白斑筛选,而X-Gal作为β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于β-半乳糖苷酶...
科研战神·王
2024-05-09 05:54
医学
原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果
2.2
IPTG
诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的试管中,37℃220rpm振摇过夜;2.2.2次日按1:100接种于50μg/mlKan的30mlLB培养液中,37℃220rpm...
超困困狗g
2024-05-06 06:00
医学
你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
图片微生物培养常用溶液在微生物培养中,LB培养基当属最常见的,另外还有Ampicillin可用于筛选抗性菌,
IPTG
一般用于蓝白斑筛选,而X-Gal作为β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于β-半乳糖苷酶...
医学验证123
2024-04-19 05:17
分子生物
干货分享|你的生物实验室的缓冲液,是这些吗?
在微生物培养中,LB培养基当属最常见的,另外还有Ampicillin可用于筛选抗性菌,
IPTG
一般用于蓝白斑筛选,而X-Gal作为β-半乳糖苷酶的显色底物,常用于β-半乳糖苷酶原位染色检测及蓝白斑筛...
科研顾问_Gu
2024-04-17 12:42
微生物
蛋白表达成包涵体
最近在做BL21(DE3)表达转氨酶,但表达出的蛋白一直都是包涵体。低温,低OD,低
iptg
诱导也都是包涵体,有大神帮忙分析一下是什么原因吗
1457155427
2024-04-15 03:47
生物科学
实验技能分享|载体构建及原核表达
待OD600=0.6-0.8时,取1mL菌液作为未诱导全菌样品对比,并向剩余菌液中加入终浓度为0.5mM的
IPTG
,置于摇床上低温180rpm诱导过夜。3.3超声破碎菌液a.从过夜诱导后的菌液中取1mL作为诱导后全...
科研狗的日常吖
2024-02-29 10:00
分子生物
原核表达诱导不出来,6月份还能诱导出来,同样的条件现在诱导不...
我重新连接转化按原步骤重新构建了质粒,也是测序正确诱导不出来啊啊啊啊啊啊我诱导条件:37℃180r过夜诱导
iptg
浓度0.1mM-2mM设了5个梯度,没一个出来的或者我16或25℃诱导试试?我接下来要...
出被窝
2023-11-02 04:13
硕博家园
大肠杆菌克隆表达外源基因的大佬看过来
最近做了几十个基因,利用pet-28a在大肠杆菌bl21中表达。几乎都是包涵体,绝大多数菌体破碎后仍浑浊。想请教几个问题1.破碎后菌体仍浑浊是因为包涵体的存在吗?...补充:
IPTG
0.2mM,20度诱导24h
Zhaoqiong1
2023-09-15 12:43
生物科学
手把手教你做“蛋白纯化”
3、小诱导摸索最佳诱导条件:将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中,37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8,加入不同浓度
IPTG
(0.1-1mM),不同温度下诱导,随着温度降低,诱导时间延长,如37℃诱导...
科研小努力
2023-08-23 05:07
分子生物
原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果
2.2
IPTG
诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的试管中,37℃220rpm振摇过夜;2.2.2次日按1:100接种于50μg/mlKan的30mlLB培养液中,37℃220rpm...
百事可爱66
2023-08-15 08:14
生物科学
蛋白纯化的步骤
3、小诱导摸索最佳诱导条件:将摇过夜的菌液1:1000接种到3mLLB中,37℃摇4-5h至菌液OD600=0.6-0.8,加入不同浓度
IPTG
(0.1-1mM),不同温度下诱导,随着温度降低,诱导时间延长,如37℃诱导...
科研小努力
2023-08-15 05:23
生物科学
原核蛋白表达的整体实验流程和具体实验结果
2.2
IPTG
诱导融合蛋白的表达2.2.1挑取转化平板上的单克隆接种于含50μg/mlKan的3mlLB培养液的试管中,37℃220rpm振摇过夜;2.2.2次日按1:100接种于50μg/mlKan的30mlLB培养液中,37℃220rpm...
科研小努力
2023-08-09 03:02
生物科学
干货分享|手把手教你做“蛋白纯化”
异丙基硫代半乳糖苷(
IPTG
)的作用与异乳糖相同,是一种作用极强的诱导剂,不被细菌代谢而十分稳定,因此被实验室广泛应用。2、宿主菌株的选择:(1)BL21是最常用于原核表达的菌株之一,...
李英华001
2023-08-08 06:07
分子生物
原核表达 未诱导的和诱导的蛋白表达一样多
载体pet28aIPTG诱导0.2-0.6mM,菌体长到0.78OD时开始诱导,诱导温度37℃,诱导时间6小时,发现加了
IPTG
的诱导组菌体长得少,所以统一诱导组和未诱导组OD值,取菌液进行离心加上样缓冲液煮沸...
食品考研!
2023-07-25 02:16
药品生产
BL21表达蛋白 后期自溶
BL21,OD26开始降温37—32—25,降温结束OD35,发酵10h加入0.4mMIPTG诱导,发酵16hOD82,然后溶氧开始下降,菌体自溶,发酵液呈鼻涕状...单独检测
IPTG
无噬菌斑,有没有大佬能帮忙解释一下原因
毒蛋白。
2023-07-03 04:36
分子生物
沙门氏菌基因敲除求大佬指导!
诱导的时候菌摇到OD0.4-0.6,加了100mM的
IPTG
诱导T5启动子进行同源重组修复1h,加1M的L-阿拉伯糖诱导cas9蛋白切割基因组,最后涂抗性和阿拉伯糖平板,菌落长出来之后pcr验证。pcr验证之后...
GracyGao
2023-05-12 03:11
生物科学
【求助】蛋白表达不出来
最近在表达一个蛋白,试表达条件1mM的
IPTG
,37度过夜诱导,跑胶也有条带,但是大摇的时候在OD值0.6左右诱导,要么不表达,要么都在沉淀里头,还有什么改进的方法吗?
111_oialt
2023-05-11 01:31
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