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橘子味味味儿

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[求助] BL21大肠杆菌蛋白表达

分别加入IPTG使浓度0.2mM、0.4mM、0.6mM，培养过夜，测od600nm，数值没有对照高，这是什么情况？

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一志愿哈工大 085600 277 12材科基求调剂已经有28人回复

1楼 2025-05-27 20:44:00

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橘子味味味儿

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SDS-PAGE，条带不明显，和对照没区别，为什么不表达？

2楼2025-05-27 22:23:24

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fyx123321

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引用回帖:

2楼: Originally posted by 橘子味味味儿 at 2025-05-27 22:23:24
SDS-PAGE，条带不明显，和对照没区别，为什么不表达？

看看你表达的这个蛋白是不是文章报道过的，原因挺多的，可能是密码子优化不行，也可能是构建的质粒不对

发自小木虫IOS客户端

3楼2025-06-03 09:28:59

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yijuyang

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过夜诱导的话，温度不能高，否则菌早早进入衰亡期，OD600会下降。

季老说过”真话不全说，假话全不说“。

4楼2025-08-12 16:22:07

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