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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » BL21大肠杆菌蛋白表达
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橘子味味味儿

金虫 (小有名气)

[求助] BL21大肠杆菌蛋白表达

分别加入IPTG使浓度0.2mM、0.4mM、0.6mM，培养过夜，测od600nm，数值没有对照高，这是什么情况？
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1楼 2025-05-27 20:44:00
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橘子味味味儿

金虫 (小有名气)
SDS-PAGE，条带不明显，和对照没区别，为什么不表达？
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2楼2025-05-27 22:23:24
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fyx123321

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 橘子味味味儿 at 2025-05-27 22:23:24
SDS-PAGE，条带不明显，和对照没区别，为什么不表达？

看看你表达的这个蛋白是不是文章报道过的，原因挺多的，可能是密码子优化不行，也可能是构建的质粒不对

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3楼2025-06-03 09:28:59
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yijuyang

银虫 (小有名气)
过夜诱导的话，温度不能高，否则菌早早进入衰亡期，OD600会下降。
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季老说过”真话不全说，假话全不说“。
4楼2025-08-12 16:22:07
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