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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

[求助] 质粒单酶切,通过电泳能否知道酶切是否充分 已有3人参与

我用EcoRV酶切pCDNA3.1/V5-HisB,我想知道酶切的是否充分,还请各位大神不吝赐教,谢谢啦
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科学小覃

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by tianyufeiyu at 2015-12-29 11:06:00
也就是说电泳是可以看到酶切的效果,请问你还知不知道有其他的方法...

做一个转化,线性质粒一般转不进细菌里,若正常转化一个转化子都没有,则酶切基本完全。
生物科学
4楼2015-12-29 21:24:32
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科学小覃

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
tianyufeiyu: 金币+3 2016-01-14 16:22:04
tianyufeiyu: 金币+2 2016-01-14 16:24:55
线性质粒一般要比超螺旋质粒跑得慢,如果酶切后电泳只有一条带就应该是酶切充分了,跑得时间要长一点,最好加个未酶切的作对照。
生物科学
2楼2015-12-28 19:27:59
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-28 19:27:59
线性质粒一般要比超螺旋质粒跑得慢,如果酶切后电泳只有一条带就应该是酶切充分了,跑得时间要长一点,最好加个未酶切的作对照。

也就是说电泳是可以看到酶切的效果,请问你还知不知道有其他的方法
3楼2015-12-29 11:06:00
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tianyufeiyu

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 科学小覃 at 2015-12-28 19:27:59
线性质粒一般要比超螺旋质粒跑得慢,如果酶切后电泳只有一条带就应该是酶切充分了,跑得时间要长一点,最好加个未酶切的作对照。

谢谢
5楼2015-12-30 11:22:36
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