| 查看: 854 | 回复: 3 | |||||
[求助]
葡聚糖凝胶纯化蛋白 已有1人参与
|
| 本人用的G-75的凝胶过蛋白，蛋白我用水重悬的，然后冷离心，过滤膜，但是蛋白还是没有洗脱出来，我又重复了一次。然后我用0.1mol NaOH清洗，有蛋白被洗脱出来，就怀疑蛋白沉淀了易或是柱子堵住了，然后就重新装柱，再进样品，结果还是没有洗脱出来。然后发现4°剩余的蛋白已经有部分沉淀了，就怀疑蛋白质的稳定性比较差，希望各位高人给点建议对于蛋白质稳定性有增加？或者是我上述有什么不对的地方才导致的这种结果？ |
回复此楼» 猜你喜欢
【实验干货】生物超薄切片+HRTEM：线粒体嵴原子像一步到位
已经有0人回复
-
食品科学论文润色/翻译怎么收费?
已经有218人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质纯化亲和层析分离技术
已经有50人回复
- 蛋白纯化实验，去除色素干扰问题，求高人指点
已经有0人回复
- 树脂g25与葡聚糖凝胶g25是一样的吗？
已经有0人回复
- 柱层析葡聚糖凝胶G-100纯化蛋白出来的峰又宽，峰又没有分开怎么办
已经有2人回复
- 求助，本人做葡聚糖凝胶分离纯化蛋白肽，不知道紫外检测仪设置多少纳米的波长
已经有3人回复
- 葡聚糖凝胶装柱时，流速很慢，何种原因？如何解决？
已经有14人回复
- 用葡聚糖凝胶G-200分离酶蛋白
已经有4人回复
- 层析柱分离纯化，懂得亲们来帮帮忙啊
已经有27人回复
- 请教关于Sephacryl 丙烯酰胺葡聚糖凝胶的问题~~
已经有5人回复
- 葡聚糖凝胶层析问题
已经有1人回复
- 分子量不高的物质纯化能用凝胶过滤吗
已经有13人回复
- 丙烯葡聚糖凝胶s-100和葡聚糖凝胶G-100层析的选择
已经有2人回复
- 葡聚糖凝胶分离蛋白
已经有0人回复
- 抗血清的纯化方法
已经有10人回复
- 葡聚糖凝胶G200纯化蛋白的效率问题
已经有0人回复
- 关于细菌蛋白质分离纯化
已经有8人回复
- 【求助/交流】葡聚糖凝胶层析 流速变小
已经有4人回复
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - 食品EPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
MR_zang(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助，请继续为其他虫友解答噢！ 2015-12-21 09:33:24
MR_zang: 金币+3 2015-12-21 14:14:42
感谢参与，应助指数 +1
MR_zang(99503102代发): 金币+2, 谢谢应助，请继续为其他虫友解答噢！ 2015-12-21 09:33:24
MR_zang: 金币+3 2015-12-21 14:14:42
|
问题描述的不是很清楚。蛋白什么来源？用水重悬的是什么蛋白，纯度多少，杂质大概都有啥？没洗出来你是如何判断的?4°剩余的用水重悬的蛋白有部分沉淀，是温度降低溶解度降低么，还是蛋白变性了？ 建议，蛋白在纯水中的稳定性很差，建议重悬时使用一定浓度的缓冲液，比如50mM 的PBS。等。另外过凝胶过滤柱子，你的没洗出来是否是体积没洗够，祝顺利。 |
2楼2015-12-21 09:16:34
3楼2015-12-21 14:14:38
hc-material
专家顾问 (职业作家)
-
专家经验: +702 - 食品EPI: 1
- 应助: 517 (博士)
- 金币: 462.9
- 散金: 18028
- 红花: 313
- 帖子: 3594
- 在线: 518.8小时
- 虫号: 4027804
- 注册: 2015-08-18
- 性别: GG
- 专业: 核技术及其应用
- 管辖: 生物科学
4楼2015-12-21 14:17:58