24小时热门版块排行榜    

查看: 2929  |  回复: 20

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序无结果是什么情况? 已有8人参与

做了质粒构建,转化涂板,挑了单克隆摇菌后把菌液送去测序,结果测序都失败了,测序公司给的回复如图。哪位大神能指点一下是哪里出错了

测序无结果是什么情况?
6{9{EFJC]_AO6]63B]TJ$V7.png


测序无结果是什么情况?-1
IK$(OVMA}}3LE1J_J(9LHFJ.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)

本帖仅楼主可见
12楼2015-11-26 13:53:11
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 温室里的杂草 at 2015-11-25 19:51:17
但是即使是没有把目的基因插进去,测序的时候应该也会有载体的序列吧,不可能什么都没有啊...

如果连质粒都没有转进去的话也不会有载体序列的,我之前也出现过这种情况。
5楼2015-11-25 20:34:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

djbitter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, 有帮助 2015-11-25 21:22:35
选用载体是否正确;确保培养板抗性没有失效、培养时间没有过久;单克隆PCR鉴定可以用载体多克隆位点上下游引物(即使空载体也能扩增出条带)、基因特异引物;进一步确认,阳性克隆质粒酶切鉴定;还有可能,测序公司出错。
6楼2015-11-25 20:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misang

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1, 有帮助 2015-11-26 12:13:32
温室里的杂草: 金币+3, 有帮助 2015-11-26 15:23:53
可能是假阳性克隆,重新挑吧

发自小木虫Android客户端
7楼2015-11-25 23:21:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy_zhaoyuan

铁虫 (初入文坛)

测序样品浓度过低也有可能测不到信号

发自小木虫Android客户端
8楼2015-11-25 23:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

juzhixianwei

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
测序前质粒测浓度了没?是不是提取的有问题
9楼2015-11-25 23:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

帖子不要沉啊
2楼2015-11-25 19:36:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1 2015-11-25 19:51:39
个人觉得你没有把目的基因克隆进去,建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下,这样可以保证你的目的基因放进去了。
3楼2015-11-25 19:46:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 沐枫之城 at 2015-11-25 19:46:34
个人觉得你没有把目的基因克隆进去,建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下,这样可以保证你的目的基因放进去了。

但是即使是没有把目的基因插进去,测序的时候应该也会有载体的序列吧,不可能什么都没有啊
4楼2015-11-25 19:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shengliding

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, 有帮助 2015-11-26 12:15:27
一般送去测序的样品首先要做个PCR筛选,确定有片段连上,而不是没做任何检测直接就送样。测序没结果的话,应是公司方面的问题。
另外,测序最好自己做PCR反应,过柱纯化后送去直接读结果。
10楼2015-11-26 08:44:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 温室里的杂草 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +21 医学老男孩 2026-08-13 46/2300 2026-08-14 16:44 by ttzzttzz01
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +6 majunge000 2026-08-11 8/400 2026-08-14 14:44 by 医学老男孩
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +23 Lanmanbaby 2026-08-09 37/1850 2026-08-14 13:40 by Equinoxhua
[基金申请] 好奇怪的filecode +6 布布和一二 2026-08-08 7/350 2026-08-14 13:38 by Equinoxhua
[基金申请] filecode +5 cratir 2026-08-14 9/450 2026-08-14 12:25 by 医学老男孩
[硕博家园] 请教兼职经验 +3 是阿文鸭 2026-08-09 3/150 2026-08-14 12:07 by HER12025
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +10 家与远方 2026-08-10 15/750 2026-08-14 02:08 by 绵羊哥哥
[硕博家园] 一作与独作在应聘高校教师时区别大吗 +3 mbygzh 2026-08-08 4/200 2026-08-13 19:31 by 龙-樱
[基金申请] 静等基金结果 +8 gjjjzhong 2026-08-10 21/1050 2026-08-13 17:56 by 且听虎啸
[基金申请] 不应该看fileCode +7 且听虎啸 2026-08-12 9/450 2026-08-13 14:27 by flydreamws
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +4 布布和一二 2026-08-11 5/250 2026-08-13 12:56 by cratir
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
信息提示
请填处理意见