应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 测序无结果是什么情况？
212/3返回列表上一页123下一页
查看: 2725  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by juzhixianwei at 2015-11-25 23:43:18
测序前质粒测浓度了没？是不是提取的有问题

我是把菌液直接送去测序的，没有提质粒
赞一下 回复此楼
11楼2015-11-26 12:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
12楼2015-11-26 13:53:11
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

wjasaa

金虫 (初入文坛)
送测前自己筛选一下菌落，可以通过菌液PCR和提质粒酶切的方式，另外检查一下你的方案和载体是否正确。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
WWW.ABMGOOD.COM
13楼2015-11-26 13:58:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by misang at 2015-11-25 23:21:12
可能是假阳性克隆，重新挑吧

造成假阳性克隆的原因可能有哪些呢？有可能是因为感受态细胞活性的原因吗？
赞一下 回复此楼
14楼2015-11-26 15:23:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
9楼: Originally posted by juzhixianwei at 2015-11-25 23:43:18
测序前质粒测浓度了没？是不是提取的有问题

我是送菌液去测序的
赞一下 回复此楼
15楼2015-11-26 15:53:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

表弟爱网游

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:30:30
送样测序之前做一次菌液PCR检测一下，如果担心是测序公司的问题，可以送空载体测序，PET-28算低拷贝载体，质粒浓度一般比较低，但也不至于无信号。
赞一下 回复此楼
当一切如飞舞的落叶坠落，惋惜之余，也要学会原谅与释怀
16楼2015-11-27 09:24:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

145457367

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沐枫之城 at 2015-11-25 19:46:34
个人觉得你没有把目的基因克隆进去，建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下，这样可以保证你的目的基因放进去了。

用自己设计的引物测不出序列，用通用性引物就可以测出来是怎么回事？菌液pcr是有目的条带的，酶切验证又没有条带。
赞一下 回复此楼
17楼2015-11-27 13:41:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐枫之城

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
17楼: Originally posted by 145457367 at 2015-11-27 13:41:46
用自己设计的引物测不出序列，用通用性引物就可以测出来是怎么回事？菌液pcr是有目的条带的，酶切验证又没有条带。...

首先，菌液或者菌落PCR最好用载体中的一段加目的基因一段进行扩增；酶切验证没有条带的话你要确定你的载体构建有没有问题，是不是选错了酶切位点；没有明白用自己设计的引物测不出序列和用通用引物可以测出来是怎么回事，如果你用通用引物可以测出来那不就行了
赞一下 回复此楼
18楼2015-11-27 16:48:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blueatx

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
温室里的杂草(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:30:41
你用什么引物测序呢？通用的还是PCR的？要是PCR的引物可能就是没连上，建议先验证一下看看是不是假阳性
赞一下 回复此楼
19楼2015-12-03 09:08:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lipo2014

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
温室里的杂草(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2016-01-05 19:30:49
确实就算没插进去目的片段也应该有测序结果的，楼主你有没有问测序公司是怎么给你提的质粒啊，还有浓度什么的，引物如果是通用引物的话就可以排除引物的问题了，只能是菌或者质粒本身的问题，会不会是楼主的菌被杂菌污染了啊？仅个人猜测。。。。
赞一下 回复此楼
20楼2016-01-05 15:13:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 温室里的杂草 的主题更新
212/3返回列表上一页123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 成果系统访问量大，请一小时后再尝试。---NSFC啥时候好哦，已经两天这样了 +3 NSFC2026我来了 2026-02-28 3/150 2026-03-01 21:41 by autumntian
[考研] 306分材料调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-01 5/250 2026-03-01 19:48 by 无际的草原
[考研] 材料学硕318求调剂 +9 February_Feb 2026-03-01 11/550 2026-03-01 19:47 by 无懈可击111
[考研] 0856化工专硕求调剂 +12 董boxing 2026-03-01 12/600 2026-03-01 19:45 by 材子momo
[考研] 272求调剂 +6 材紫有化 2026-02-28 6/300 2026-03-01 18:58 by 18137688336
[考研] 0857调剂 +3 一ll半 2026-02-28 3/150 2026-03-01 18:32 by 热情沙漠
[考研] 材料类求调剂 +10 wana_kiko 2026-02-28 11/550 2026-03-01 18:11 by 海嵙Y
[考研] 化工专硕342，一志愿大连理工大学，求调剂 +3 kyf化工 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:49 by yywzz
[考研] 313求调剂 +3 水流年lc 2026-02-28 3/150 2026-03-01 16:01 by 新能源达人
[考研] 311求调剂 +6 亭亭亭01 2026-03-01 6/300 2026-03-01 15:41 by 324616
[考研] 307求调剂 +5 wyyyqx 2026-03-01 5/250 2026-03-01 15:21 by Fff-1
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-02-28 7/350 2026-03-01 15:14 by wjLi2017
[考研] 材料工程274求调剂 +3 Lilithan 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:58 by ms629
[考研] 303求调剂 +4 今夏不夏 2026-03-01 4/200 2026-03-01 14:46 by 嘟嘟小浣熊
[考研] 求调剂 +6 repeatt?t 2026-02-28 6/300 2026-03-01 14:37 by Sakura绘
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[硕博家园] 2025届双非化工硕士毕业，申博 +3 更多的是 2026-02-27 4/200 2026-03-01 10:04 by ztg729
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭