应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 测序无结果是什么情况？
211/3返回列表123下一页
查看: 2905  |  回复: 20
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序无结果是什么情况？ 已有8人参与

做了质粒构建，转化涂板，挑了单克隆摇菌后把菌液送去测序，结果测序都失败了，测序公司给的回复如图。哪位大神能指点一下是哪里出错了

测序无结果是什么情况？
6{9{EFJC]_AO6]63B]TJ$V7.png


测序无结果是什么情况？-1
IK$(OVMA}}3LE1J_J(9LHFJ.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-11-25 19:26:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)
本帖仅楼主可见
赞一下
12楼2015-11-26 13:53:11
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

沐枫之城

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 温室里的杂草 at 2015-11-25 19:51:17
但是即使是没有把目的基因插进去，测序的时候应该也会有载体的序列吧，不可能什么都没有啊...

如果连质粒都没有转进去的话也不会有载体序列的，我之前也出现过这种情况。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-11-25 20:34:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

djbitter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-11-25 21:22:35
选用载体是否正确；确保培养板抗性没有失效、培养时间没有过久；单克隆PCR鉴定可以用载体多克隆位点上下游引物（即使空载体也能扩增出条带）、基因特异引物；进一步确认，阳性克隆质粒酶切鉴定；还有可能，测序公司出错。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2015-11-25 20:53:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

misang

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1, ★有帮助 2015-11-26 12:13:32
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-11-26 15:23:53
可能是假阳性克隆，重新挑吧

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2015-11-25 23:21:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zy_zhaoyuan

铁虫 (初入文坛)
测序样品浓度过低也有可能测不到信号

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2015-11-25 23:36:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

juzhixianwei

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
测序前质粒测浓度了没？是不是提取的有问题
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-11-25 23:43:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
帖子不要沉啊
回复此楼
2楼2015-11-25 19:36:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1 2015-11-25 19:51:39
个人觉得你没有把目的基因克隆进去，建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下，这样可以保证你的目的基因放进去了。
赞一下 回复此楼
3楼2015-11-25 19:46:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 沐枫之城 at 2015-11-25 19:46:34
个人觉得你没有把目的基因克隆进去，建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下，这样可以保证你的目的基因放进去了。

但是即使是没有把目的基因插进去，测序的时候应该也会有载体的序列吧，不可能什么都没有啊
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-25 19:51:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shengliding

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-11-26 12:15:27
一般送去测序的样品首先要做个PCR筛选，确定有片段连上，而不是没做任何检测直接就送样。测序没结果的话，应是公司方面的问题。
另外，测序最好自己做PCR反应，过柱纯化后送去直接读结果。
赞一下 回复此楼
10楼2015-11-26 08:44:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 温室里的杂草 的主题更新
211/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭