【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

解密度鲁特韦——新一代HIV整合酶抑制剂的化学、药理与产业化图景已经有0人回复
左炔诺孕酮从沃氏氧化物到炔基化反应的工艺迭代与靶点解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有108人回复
“关闭瘙痒信号”的多肽地非法林醋酸盐全解析已经有1人回复
Tosylate-DPA-714介导¹⁸F-DPA-714 PET成像的前沿进展已经有0人回复
I-BRD9: BRD9溴结构域化学探针，BET选择性>700倍已经有0人回复
莫那利珠单抗阻断NKG2A/HLA-E抑制通路 | Biochempartner 已经有0人回复
GSPT1口服分子胶降解剂MRT-2359 | Biochempartner 已经有0人回复
碳青霉烯类抗生素为何需联用西司他丁钠？ | Biochempartner 已经有0人回复
源自蕨类植物的抗炎美白活性分子去甲氧基荚果蕨素 | Biochempartner 已经有0人回复
肠道里的"代谢开关"：Fexaramine用肠道限制性重新定义 FXR 激动剂已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

1楼 2015-11-25 19:26:46

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

匿名

用户注销 (正式写手)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 26.4
散金: 1066
红花: 4
帖子: 930
在线: 205小时
虫号: 0
注册: 2010-10-18
性别: GG
专业: 生物化学

本帖仅楼主可见

12楼2015-11-26 13:53:11

已阅申请MolEPI 回复此楼编辑查看我的主页

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 118.2
帖子: 49
在线: 97小时
虫号: 2495692
注册: 2013-06-04
专业: 作物分子育种

引用回帖:

4楼: Originally posted by 温室里的杂草 at 2015-11-25 19:51:17
但是即使是没有把目的基因插进去，测序的时候应该也会有载体的序列吧，不可能什么都没有啊...

如果连质粒都没有转进去的话也不会有载体序列的，我之前也出现过这种情况。

5楼2015-11-25 20:34:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

djbitter

新虫 (小有名气)

应助: 19 (小学生)
金币: 812.7
帖子: 80
在线: 23.8小时
虫号: 4041309
注册: 2015-08-28
专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-11-25 21:22:35

选用载体是否正确；确保培养板抗性没有失效、培养时间没有过久；单克隆PCR鉴定可以用载体多克隆位点上下游引物（即使空载体也能扩增出条带）、基因特异引物；进一步确认，阳性克隆质粒酶切鉴定；还有可能，测序公司出错。

6楼2015-11-25 20:53:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

misang

新虫 (正式写手)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 236.9
散金: 254
红花: 4
帖子: 309
在线: 50.4小时
虫号: 2506644
注册: 2013-06-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1, ★有帮助 2015-11-26 12:13:32
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-11-26 15:23:53

可能是假阳性克隆，重新挑吧

发自小木虫Android客户端

7楼2015-11-25 23:21:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zy_zhaoyuan

铁虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 3873.4
帖子: 22
在线: 63.6小时
虫号: 2636200
注册: 2013-09-05
性别: MM
专业: 化学生物学与生物有机化学

测序样品浓度过低也有可能测不到信号

发自小木虫Android客户端

8楼2015-11-25 23:36:01

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

juzhixianwei

铜虫 (初入文坛)

应助: 7 (幼儿园)
金币: 370.5
帖子: 28
在线: 28小时
虫号: 1837107
注册: 2012-05-28
性别: GG
专业: 生物物理、生物化学与分子

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

测序前质粒测浓度了没？是不是提取的有问题

9楼2015-11-25 23:43:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 1414
散金: 1
帖子: 33
在线: 12.5小时
虫号: 3609811
注册: 2014-12-23
专业: 细胞信号转导

帖子不要沉啊

2楼2015-11-25 19:36:40

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

沐枫之城

新虫 (初入文坛)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 118.2
帖子: 49
在线: 97小时
虫号: 2495692
注册: 2013-06-04
专业: 作物分子育种

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1 2015-11-25 19:51:39

个人觉得你没有把目的基因克隆进去，建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下，这样可以保证你的目的基因放进去了。

3楼2015-11-25 19:46:34

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 1414
散金: 1
帖子: 33
在线: 12.5小时
虫号: 3609811
注册: 2014-12-23
专业: 细胞信号转导

引用回帖:

3楼: Originally posted by 沐枫之城 at 2015-11-25 19:46:34
个人觉得你没有把目的基因克隆进去，建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下，这样可以保证你的目的基因放进去了。

但是即使是没有把目的基因插进去，测序的时候应该也会有载体的序列吧，不可能什么都没有啊

4楼2015-11-25 19:51:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

shengliding

新虫 (小有名气)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 190.3
红花: 2
帖子: 251
在线: 43.6小时
虫号: 4195264
注册: 2015-11-04
专业: 植物病理学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, ★有帮助 2015-11-26 12:15:27

一般送去测序的样品首先要做个PCR筛选，确定有片段连上，而不是没做任何检测直接就送样。测序没结果的话，应是公司方面的问题。
另外，测序最好自己做PCR反应，过柱纯化后送去直接读结果。