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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

[求助] 测序无结果是什么情况? 已有8人参与

做了质粒构建,转化涂板,挑了单克隆摇菌后把菌液送去测序,结果测序都失败了,测序公司给的回复如图。哪位大神能指点一下是哪里出错了

测序无结果是什么情况?
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测序无结果是什么情况?-1
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djbitter

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+3, 有帮助 2015-11-25 21:22:35
选用载体是否正确;确保培养板抗性没有失效、培养时间没有过久;单克隆PCR鉴定可以用载体多克隆位点上下游引物(即使空载体也能扩增出条带)、基因特异引物;进一步确认,阳性克隆质粒酶切鉴定;还有可能,测序公司出错。
6楼2015-11-25 20:53:03
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温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

帖子不要沉啊
2楼2015-11-25 19:36:40
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沐枫之城

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
温室里的杂草: 金币+1 2015-11-25 19:51:39
个人觉得你没有把目的基因克隆进去,建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下,这样可以保证你的目的基因放进去了。
3楼2015-11-25 19:46:34
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温室里的杂草

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 沐枫之城 at 2015-11-25 19:46:34
个人觉得你没有把目的基因克隆进去,建议做完转化长菌后挑单克隆做下菌落PCR或者酶切看下,这样可以保证你的目的基因放进去了。

但是即使是没有把目的基因插进去,测序的时候应该也会有载体的序列吧,不可能什么都没有啊
4楼2015-11-25 19:51:17
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