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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » cDNA模板PCR弥散带
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济云帆

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA模板PCR弥散带 已有1人参与

现在用的是cDNA为模板，SRAP 的引物，扩增。做了好几天都没有条带。而是弥散条带。反转录用的RevertAid first strand cDNA synthesis kit. RNA检测没问题。A260/280 在2左右。
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1楼 2015-10-27 19:41:38
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骆驼人

金虫 (正式写手)
我一般反转录时10微体系RNA量加1ug，之后稀释8-10倍，利用内参基因检测一下，再进行后续实验。反转录的盒子也比较重要

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愿你，温柔又坚定，不轻易许诺但许的诺一定会实现，有勇气有力量，会发现一切美好的事物
7楼2015-10-28 19:37:26
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兽医做科研

金虫 (小有名气)
你好，最近我也在做cDNA，我想请教一下，cDNA做模板进行pcr扩增的时候，cDNA加多少量
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2楼2015-10-27 20:37:59
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yangchun0
引用回帖:
2楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-10-27 20:37:59
你好，最近我也在做cDNA，我想请教一下，cDNA做模板进行pcr扩增的时候，cDNA加多少量

1ul

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3楼2015-10-27 23:35:05
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济云帆

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-10-27 20:37:59
你好，最近我也在做cDNA，我想请教一下，cDNA做模板进行pcr扩增的时候，cDNA加多少量

我一般是测了浓度，稀释成20ng/ul。原来能P出来的时候。大概浓度在100ng/20ul。

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4楼2015-10-28 06:32:36
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