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济云帆

新虫 (初入文坛)

[求助] cDNA模板PCR弥散带 已有1人参与

现在用的是cDNA为模板,SRAP 的引物,扩增。做了好几天都没有条带。而是弥散条带。反转录用的RevertAid first strand cDNA synthesis kit. RNA检测没问题。A260/280 在2左右。
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济云帆

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-10-27 20:37:59
你好,最近我也在做cDNA,我想请教一下,cDNA做模板进行pcr扩增的时候,cDNA加多少量

我一般是测了浓度,稀释成20ng/ul。原来能P出来的时候。大概浓度在100ng/20ul。

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-10-28 06:32:36
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兽医做科研

金虫 (小有名气)

你好,最近我也在做cDNA,我想请教一下,cDNA做模板进行pcr扩增的时候,cDNA加多少量
2楼2015-10-27 20:37:59
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引用回帖:
2楼: Originally posted by 兽医做科研 at 2015-10-27 20:37:59
你好,最近我也在做cDNA,我想请教一下,cDNA做模板进行pcr扩增的时候,cDNA加多少量

1ul

发自小木虫Android客户端
3楼2015-10-27 23:35:05
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兽医做科研

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 济云帆 at 2015-10-28 06:32:36
我一般是测了浓度,稀释成20ng/ul。原来能P出来的时候。大概浓度在100ng/20ul。
...

我觉得cDNA不好测浓度啊,体系里面的试剂比较多,我也是加了1微升,只是个别泳道跑出了很浅的条带,我也很郁闷
5楼2015-10-28 17:21:08
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