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行板如歌金虫 (小有名气)
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新手，求助一个问题，如何验证转录因子与目的基因互作？有哪些方法呢？ 已有3人参与
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| RT-qPCR实验筛选出了几个差异表达的基因，对这几个基因启动子区域分析，表明启动子区域含有一个能与ARF转录因子结合的顺式作用元件，但是用什么方法能验证ARF转录因子真的结合在该基因的启动子上呢？先前实验室只做到定量表达分析上，没有做过验证，有什么方法能验证蛋白质与DNA的结合呢？ |
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Neo2000
木虫 (著名写手)
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做个酵母单杂就行 发自小木虫Android客户端 |
2楼2015-09-18 16:09:05
3楼2015-09-18 16:10:57
【答案】应助回帖
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送公司把，估计一两k就出来了，酵母杂交实验要建酵母体系，很麻烦，凝胶阻滞实验要用到放射性同位素。 发自小木虫Android客户端 |
4楼2015-09-18 16:14:56
wangtaodluf
木虫 (正式写手)
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【答案】应助回帖
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chip应该是目前最直接的证明 发自小木虫Android客户端 |
5楼2015-09-18 16:54:30
huagnshaowu
禁虫 (正式写手)
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本帖内容被屏蔽 |
6楼2015-09-18 18:24:25
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7楼2015-09-18 18:36:43
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这个不清楚，我们课题组去年也遇到这问题，最后定的做酵母，因为我们的转录因子还设计到与其他蛋白形成异二聚体的问题，所以单杂双杂一起做了，就没有考虑免疫共沉淀和凝胶阻滞实验。 发自小木虫Android客户端 |
8楼2015-09-19 06:36:19
9楼2015-09-19 11:53:13
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