应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » BamH1和Kpn1 双酶切
111/2返回列表12下一页
查看: 5551  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

F_Bissextile

新虫 (初入文坛)

[求助] BamH1和Kpn1 双酶切 已有7人参与

TaKaRa公司的BamH1和Kpn1，反应体系不同，反应温度也不同。请问怎样建立双酶切体系？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2015-09-18 00:28:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

u9300108

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Maybe you can try this-https://www.neb.com/sitecore/content/nebsg/home/tools-and-resources/interactive-tools/double-digest-finder
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2015-09-18 09:15:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小人物12356

新虫 (初入文坛)
Kpn1用的20ul的体系，加1ul酶，10—15ul的DNA（根据你所提取的DNA浓度）如果加量少的话跑胶的时候会看不清条带，buffer根据所给的体系加，然后用无菌水补齐。

发自小木虫IOS客户端
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2015-09-18 10:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

老朱Supreme

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以选择双步酶切法吧，虽然回收效率会降低但是这个方法是比较经典的。
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2015-09-18 10:56:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
0.5×K buffer，请参考takara的双切表
赞一下(1人) 回复此楼
活着就要让人感受到你的存在。
8楼2015-09-18 16:27:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yangtzelv

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
参考双酶切的表格，按照takanra的操作说明即可。05xK
赞一下(1人) 回复此楼
9楼2015-09-19 17:33:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

liping121200

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们实验室都用的Takara家的酶进行酶切，都用的37度，一般20uL体系各加上1uL酶就足够了，效果都还不错，如果想反应体系严谨一点，可以根据他们公司提供的说明书加。
赞一下 回复此楼
好好学习，天天向上
3楼2015-09-18 09:20:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mr.clutch

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用一种酶单酶切后用醋酸钠乙醇沉淀，然后再用另一种酶酶切

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2015-09-18 11:47:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

南京李博士

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我们takanra   30度  酶切过夜   棒棒的！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2015-09-18 11:56:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大小白白

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by mr.clutch at 2015-09-18 11:47:09
用一种酶单酶切后用醋酸钠乙醇沉淀，然后再用另一种酶酶切

请问具体步骤是怎样的呢？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2015-09-19 17:36:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 F_Bissextile 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +8 梁茜雯 2026-03-19 8/400 2026-03-25 20:33 by 热情沙漠
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +7 niko- 2026-03-22 7/350 2026-03-25 20:14 by qingfeng258
[考研] 0856求调剂 +3 zhn03 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:02 by Ainin_
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 085602 289分求调剂 +7 WWW西西弗斯 2026-03-24 7/350 2026-03-25 14:28 by 3Strings
[考研] 284求调剂 +15 Zhao anqi 2026-03-22 15/750 2026-03-25 12:51 by wht0531
[考研] 281求调剂 +4 Koxui 2026-03-24 5/250 2026-03-25 11:38 by userper
[考研] 292求调剂 +4 鹅鹅鹅额额额额� 2026-03-25 4/200 2026-03-25 10:37 by barlinike
[考研] 0703化学求调剂 +6 奶油草莓. 2026-03-22 7/350 2026-03-25 10:00 by shangxh
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +4 13831862839 2026-03-24 5/250 2026-03-25 09:47 by 无际的草原
[考研] 化学调剂 +6 yzysaa 2026-03-21 6/300 2026-03-25 09:27 by aa331100
[考研] 材料学求调剂 +6 Stella_Yao 2026-03-20 6/300 2026-03-25 00:37 by baoball
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 291求调剂 +8 hhhhxn.. 2026-03-23 8/400 2026-03-23 23:15 by peike
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 材料学硕318求调剂 +5 February_Feb 2026-03-19 5/250 2026-03-19 23:51 by 23Postgrad
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭