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F_Bissextile

新虫 (初入文坛)

[求助] BamH1和Kpn1 双酶切 已有7人参与

TaKaRa公司的BamH1和Kpn1,反应体系不同,反应温度也不同。请问怎样建立双酶切体系?
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xujian568

至尊木虫 (著名写手)

Count XU

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
0.5×K buffer,请参考takara的双切表
活着就要让人感受到你的存在。
8楼2015-09-18 16:27:15
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u9300108

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
Maybe you can try this-https://www.neb.com/sitecore/content/nebsg/home/tools-and-resources/interactive-tools/double-digest-finder
2楼2015-09-18 09:15:38
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liping121200

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我们实验室都用的Takara家的酶进行酶切,都用的37度,一般20uL体系各加上1uL酶就足够了,效果都还不错,如果想反应体系严谨一点,可以根据他们公司提供的说明书加。
好好学习,天天向上
3楼2015-09-18 09:20:37
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小人物12356

新虫 (初入文坛)

Kpn1用的20ul的体系,加1ul酶,10—15ul的DNA(根据你所提取的DNA浓度)如果加量少的话跑胶的时候会看不清条带,buffer根据所给的体系加,然后用无菌水补齐。

发自小木虫IOS客户端
4楼2015-09-18 10:48:47
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