24小时热门版块排行榜    

查看: 9370  |  回复: 32

yinzengjie

新虫 (小有名气)

[求助] 提取DNA后,跑琼脂凝胶电泳,怎么没有出现条带,求分析 已有19人参与

怎么会出现这样的图,帮忙分析下,什么原因。

提取DNA后,跑琼脂凝胶电泳,怎么没有出现条带,求分析
6ZIYLH7M6~G7G@L7E41QFWU.png
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

viki_MDK

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:23
降解了,,其实还能看到完整的片段,最上面的条带,,如果样本没有了,,可以割胶回收最上面那个条带,,有的话重新提取,提取中小心些,,避免反复冻融。
3楼2015-09-15 10:46:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zqw徒弟

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
降解了,你查下步骤看哪里有过剧烈的摇晃
15楼2015-09-16 09:03:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

然处

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yinzengjie: 金币+5 2015-09-25 16:31:52
引用回帖:
14楼: Originally posted by yinzengjie at 2015-09-16 08:23:54
(1)检测中去,但是DNA提取过程中,RNA不稳定,应该没有了吧?
(2)测230,260吸光度,需要用去离子水稀释还是用TE缓冲液稀释DNA样品,
(3)我的DNA只有50ul,比色皿4ml,稀释100倍不知道可以不?...

有时候还是会有rna污染,确实不多。我们都是用depc水稀释的。有专门测核酸的吸光度机的,用1微升原液就可以

发自小木虫Android客户端
迷茫会结束的
19楼2015-09-16 13:02:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑小霏

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
17楼: Originally posted by yinzengjie at 2015-09-16 10:57:14
只是进行了总DNA提取,没有进行PCR扩增,就是看是否有DNA才进行跑胶测定的,有加longding buffer,
(1)我的电泳图怎么样,还是不好
(2)有没有提取污泥DNA的方法,提供下...

我做的是稻田土壤微生物的,用的试剂盒,我觉得你的DNA提取方法不是不可以。提的总DNA的话产生这种弥散是正常的,因为DNA中含有杂质,并且DNA所含种类甚多,这些DNA没有相同的退火温度,我觉得出现这种弥散是正常现象。你需要PCR扩增,这样才能把目的DNA扩出来,现在这样单纯的跑总DNA是没有意义的。
20楼2015-09-16 13:27:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

书生的哥哥啊

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:51
正常啊,你这是提取的DNA,又没有PCR过,最上面的那个就是你提的啊,你没有试试怎么知道用这个P不出来呢,是吧

发自小木虫Android客户端
6楼2015-09-15 16:55:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

微笑小霏

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yinzengjie: 金币+5, 有帮助 2015-09-16 14:34:26
yinzengjie: 金币+5 2015-09-25 16:31:23
你做的是活性淤泥的,提的DNA不是单独的DNA而是一个总量的DNA,跑出弥散是正常的,不清楚你跑DNA是什么目的,一般是看是否有DNA才进行跑胶测定,另外,你有没有加loading buffer,没有加的话也有弥散的可能。若是提完了短时间(1~2d)是不会降解的,DNA断裂也相当的不容易,除非有剧烈的震荡了。退火温度倒是有可能的。
16楼2015-09-16 09:08:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

learningying

铁杆木虫 (著名写手)

这是基因组还是RNA如果是的话,先告诉你核酸降解啦。。。

发自小木虫Android客户端
加油,天道酬勤
24楼2015-09-16 19:37:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

kobe199613

木虫之王 (知名作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:16
好像是DNA断裂了,DNA为长链核酸,容易断裂,提取的操作中应避免搅拌过度导致断裂。
个人观点,仅供参考

发自小木虫Android客户端
【招聘】医用高分子材料研发工程师(北京)
2楼2015-09-15 10:43:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Mr. Cong

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:34
请问是用什么方法提的DNA?
4楼2015-09-15 14:53:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jeff瓜瓜

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:40
条带弥散,提高退火温度可以增加条带的特异性,不妨试一下
5楼2015-09-15 16:02:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是讲解了,条带弥散的

发自小木虫IOS客户端
7楼2015-09-15 20:18:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinzengjie

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by Mr. Cong at 2015-09-15 14:53:32
请问是用什么方法提的DNA?

电泳图从左往右,1号没有研磨,2,3号用研钵研磨了活性污泥
提取DNA后,跑琼脂凝胶电泳,怎么没有出现条带,求分析-1
1.jpg


提取DNA后,跑琼脂凝胶电泳,怎么没有出现条带,求分析-2
2.jpg

8楼2015-09-15 21:00:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinzengjie

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 书生的哥哥啊 at 2015-09-15 16:55:30
正常啊,你这是提取的DNA,又没有PCR过,最上面的那个就是你提的啊,你没有试试怎么知道用这个P不出来呢,是吧

是的,我的样品是活性污泥,我现在的电泳图只是进行了DNA 提取,并没有进行PCR扩增。请问图上部应该是我提取的DNA条带吧?刚接触分子生物。
为什么会有那么长的拖尾呢?
(1)拖尾是DNA降解了还是DNA断裂了?
(2)拖尾还是因为提取的DNA中有杂质像RNA/腐殖酸/蛋白质等?
这样的条带对我将来需要做DGGE和qPCR可以用吗,有影响吗
                                                                 非常感谢回答
9楼2015-09-15 21:17:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1314308002

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,分子生物期待您更多精彩。 2015-09-16 20:09:28
用试剂盒提取,powersoil可以试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
10楼2015-09-16 06:59:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yinzengjie 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 7/350 2026-09-01 15:18 by myrtle
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 15/750 2026-09-01 12:23 by icm639
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 系统进不去 +4 yanglien 2026-08-26 5/250 2026-08-26 11:10 by wenfengw83
[基金申请] 项目信息和经费信息在系统里都可以看到了 +6 wittyboy 2026-08-26 14/700 2026-08-26 10:55 by wittyboy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
信息提示
请填处理意见