【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析已经有0人回复
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有265人回复
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析已经有0人回复
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析已经有0人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点已经有0人回复
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复
氢氧化钾活化操作已经有18人回复
散金已经有68人回复
生物质超级电容器已经有0人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

总DNA提取后跑琼脂凝胶电泳图条带问题已经有0人回复
昆虫DNA试剂盒提取与琼脂糖凝胶电泳已经有0人回复
提取DNA后，跑胶图如下，怎么分析是否降解？已经有2人回复
跑琼脂糖凝胶电泳不知道选多大的marker，求大家看看，给个帮助，万分感谢！已经有1人回复
DNA试剂盒提取完DNA后的问题已经有17人回复
跑PCR，琼脂糖电泳没有条带出现已经有14人回复
提取基因组，跑胶条带漂移，每次跑胶条带大小都不一样。已经有5人回复
沙门氏菌提取DNA模板直接加6乘buffer跑琼脂糖能检测我是否提取到DNA了吗？已经有1人回复
大虾些帮小弟看看这张检测土壤总DNA提取情况的琼脂糖凝胶电泳图已经有9人回复
土壤微生物DNA提取不出来，是什么原因？已经有19人回复
检测基因组DNA的琼脂糖凝胶电泳图，，，怎么分析。。。已经有10人回复
【原创】原创之六：环境样品总DNA的提取与纯化【已搜索无重复】已经有178人回复
【求助/交流】提取基因组DNA后琼脂糖凝胶电泳显示拖尾已经有12人回复

1楼 2015-09-15 10:16:50

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

viki_MDK

银虫 (正式写手)

应助: 34 (小学生)
金币: 212.5
散金: 573
红花: 1
帖子: 897
在线: 541.4小时
虫号: 1317798
注册: 2011-06-08
专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:23

降解了，，其实还能看到完整的片段，最上面的条带，，如果样本没有了，，可以割胶回收最上面那个条带，，有的话重新提取，提取中小心些，，避免反复冻融。

3楼2015-09-15 10:46:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zqw徒弟

铜虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 45.5
散金: 60
帖子: 66
在线: 39.8小时
虫号: 3426146
注册: 2014-09-18
性别: GG
专业: 肿瘤发生

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

降解了，你查下步骤看哪里有过剧烈的摇晃

15楼2015-09-16 09:03:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

然处

金虫 (小有名气)

应助: 11 (小学生)
金币: 1186.1
散金: 95
红花: 2
帖子: 158
在线: 49.3小时
虫号: 3152571
注册: 2014-04-21
性别: GG
专业: 基因表达调控与表观遗传学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
yinzengjie: 金币+5 2015-09-25 16:31:52

引用回帖:

14楼: Originally posted by yinzengjie at 2015-09-16 08:23:54
（1）检测中去，但是DNA提取过程中，RNA不稳定，应该没有了吧？
（2）测230，260吸光度，需要用去离子水稀释还是用TE缓冲液稀释DNA样品，
（3）我的DNA只有50ul,比色皿4ml，稀释100倍不知道可以不？...

有时候还是会有rna污染，确实不多。我们都是用depc水稀释的。有专门测核酸的吸光度机的，用1微升原液就可以

发自小木虫Android客户端

迷茫会结束的

19楼2015-09-16 13:02:17

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

微笑小霏

新虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 6
在线: 3.5小时
虫号: 2366343
注册: 2013-03-21

引用回帖:

17楼: Originally posted by yinzengjie at 2015-09-16 10:57:14
只是进行了总DNA提取，没有进行PCR扩增，就是看是否有DNA才进行跑胶测定的，有加longding buffer,
（1）我的电泳图怎么样，还是不好
（2）有没有提取污泥DNA的方法，提供下...

我做的是稻田土壤微生物的，用的试剂盒，我觉得你的DNA提取方法不是不可以。提的总DNA的话产生这种弥散是正常的，因为DNA中含有杂质，并且DNA所含种类甚多，这些DNA没有相同的退火温度，我觉得出现这种弥散是正常现象。你需要PCR扩增，这样才能把目的DNA扩出来，现在这样单纯的跑总DNA是没有意义的。

20楼2015-09-16 13:27:06

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

书生的哥哥啊

铜虫 (初入文坛)

应助: 8 (幼儿园)
金币: 410.8
帖子: 46
在线: 10小时
虫号: 3764658
注册: 2015-03-25
专业: 生物物理、生物化学与分子

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:51

正常啊，你这是提取的DNA，又没有PCR过，最上面的那个就是你提的啊，你没有试试怎么知道用这个P不出来呢，是吧

发自小木虫Android客户端

赞一下(1人)

6楼2015-09-15 16:55:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

微笑小霏

新虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 1
帖子: 6
在线: 3.5小时
虫号: 2366343
注册: 2013-03-21

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yinzengjie: 金币+5, ★有帮助 2015-09-16 14:34:26
yinzengjie: 金币+5 2015-09-25 16:31:23

你做的是活性淤泥的，提的DNA不是单独的DNA而是一个总量的DNA，跑出弥散是正常的，不清楚你跑DNA是什么目的，一般是看是否有DNA才进行跑胶测定，另外，你有没有加loading buffer，没有加的话也有弥散的可能。若是提完了短时间（1~2d）是不会降解的，DNA断裂也相当的不容易，除非有剧烈的震荡了。退火温度倒是有可能的。

赞一下(1人)

16楼2015-09-16 09:08:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

learningying

铁杆木虫 (著名写手)

应助: 8 (幼儿园)
金币: 5431.9
散金: 323
红花: 34
帖子: 1075
在线: 256.9小时
虫号: 2055341
注册: 2012-10-11
性别: GG
专业: 生物化学

这是基因组还是RNA如果是的话，先告诉你核酸降解啦。。。

发自小木虫Android客户端

赞一下(1人)

加油，天道酬勤

24楼2015-09-16 19:37:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

kobe199613

木虫之王 (知名作家)

应助: 51 (初中生)
贵宾: 0.198
金币: 70494.8
散金: 3123
红花: 231
沙发: 29
帖子: 5505
在线: 979.1小时
虫号: 606575
注册: 2008-09-19
性别: GG
专业: 畜牧学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:16

好像是DNA断裂了，DNA为长链核酸，容易断裂，提取的操作中应避免搅拌过度导致断裂。
个人观点，仅供参考

发自小木虫Android客户端

【招聘】医用高分子材料研发工程师（北京）

2楼2015-09-15 10:43:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Mr. Cong

铁虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 9.8
帖子: 11
在线: 8.6小时
虫号: 3977401
注册: 2015-07-18

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:34

请问是用什么方法提的DNA？

4楼2015-09-15 14:53:32

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

jeff瓜瓜

铁虫 (小有名气)

应助: 10 (幼儿园)
金币: 224
散金: 168
红花: 1
帖子: 76
在线: 16.6小时
虫号: 4059157
注册: 2015-09-08
性别: GG
专业: 植物病理学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-15 19:13:40

条带弥散，提高退火温度可以增加条带的特异性，不妨试一下

5楼2015-09-15 16:02:51

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

憨憨可爱多

木虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 2554.3
散金: 16
红花: 1
帖子: 342
在线: 93小时
虫号: 1906119
注册: 2012-07-23
性别: GG
专业: 林木遗传育种学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

应该是讲解了，条带弥散的

发自小木虫IOS客户端

7楼2015-09-15 20:18:57

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yinzengjie

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 520.4
帖子: 77
在线: 82.3小时
虫号: 1436082
注册: 2011-10-10
专业: 环境工程

引用回帖:

4楼: Originally posted by Mr. Cong at 2015-09-15 14:53:32
请问是用什么方法提的DNA？

电泳图从左往右，1号没有研磨，2,3号用研钵研磨了活性污泥

1.jpg

2.jpg

8楼2015-09-15 21:00:12

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yinzengjie

新虫 (小有名气)

应助: 2 (幼儿园)
金币: 520.4
帖子: 77
在线: 82.3小时
虫号: 1436082
注册: 2011-10-10
专业: 环境工程

引用回帖:

6楼: Originally posted by 书生的哥哥啊 at 2015-09-15 16:55:30
正常啊，你这是提取的DNA，又没有PCR过，最上面的那个就是你提的啊，你没有试试怎么知道用这个P不出来呢，是吧

是的，我的样品是活性污泥，我现在的电泳图只是进行了DNA 提取，并没有进行PCR扩增。请问图上部应该是我提取的DNA条带吧？刚接触分子生物。
为什么会有那么长的拖尾呢？
（1）拖尾是DNA降解了还是DNA断裂了？
（2）拖尾还是因为提取的DNA中有杂质像RNA/腐殖酸/蛋白质等？
这样的条带对我将来需要做DGGE和qPCR可以用吗，有影响吗
非常感谢回答

9楼2015-09-15 21:17:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

1314308002

新虫 (小有名气)

应助: 3 (幼儿园)
金币: 42.1
散金: 4
帖子: 118
在线: 90.2小时
虫号: 3089582
注册: 2014-03-26
专业: 生物化工与食品化工

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，分子生物期待您更多精彩。 2015-09-16 20:09:28

用试剂盒提取，powersoil可以试试

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]