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TT-Mac

新虫 (正式写手)

[求助] 菌液浓度的确定已有3人参与

各位大师,请帮忙解答。问题1:现在在测量菌液的od值,然后确定生长曲线,但是测出来的od很小,没到0.1。问题出在哪里了呢?(od600,大肠杆菌)
2、现在有个想法,不知道对不对,是这样的,假如测得标准曲线后,实验之前就拿配好的菌液去测od,对应的就可以知道菌液浓度(菌落数的范围),然后是不是可以根据:菌落数*稀释倍数=原始菌液浓度,这个来进行稀释到所需要的菌液浓度呢?即需要的菌落数范围
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阳光宅男
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TT-Mac

新虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 蜡笔小旧87 at 2015-09-14 15:59:31
不行 OD与活菌数没有直接的对应关系, 只存在正相关。

通过这个相关就可以确定大概的菌液浓度吗?或者说菌落数
阳光宅男
10楼2015-09-14 21:25:43
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smilingworld

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励应助 2015-09-14 20:19:12
楼主说的第一个问题原因太多了,也太含糊了。培养了多少个小时,测OD值的时候菌液稀释了么,初试OD是多少,每一步都控制严格了,才能对现在出现的问题所想解决的方法。第二个问题,我要是没理解错的话,只能说做参考,但是不会很准确,测定的OD值所对应的菌落,只能是一个大概,不会说OD=1.0时,CFU就是10的9次方这么准,即便根据“菌落数*稀释倍数=原始菌液浓度”这个来稀释得到所需菌液浓度了,也要在培养基上做CFU计数!
2楼2015-09-12 15:34:31
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TT-Mac

新虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by smilingworld at 2015-09-12 15:34:31
楼主说的第一个问题原因太多了,也太含糊了。培养了多少个小时,测OD值的时候菌液稀释了么,初试OD是多少,每一步都控制严格了,才能对现在出现的问题所想解决的方法。第二个问题,我要是没理解错的话,只能说做参考 ...

谢谢,菌种培养了72个小时,其实想做的是标准曲线,测od的时候菌液稀释了10倍,100倍,1000倍,5000倍。但是出来的值很小,没到0.1,稀释到5000倍的菌液测得的od值是负数。还有就是初试od是什么意思呢?第一次接触,望指教。
第二个问题,其实能确定大概的菌落范围就可以了,所以“菌落数*稀释倍数=原始菌液浓度”来稀释是不是可行呢?
阳光宅男
3楼2015-09-14 10:09:24
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smilingworld

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by TT-Mac at 2015-09-14 10:09:24
谢谢,菌种培养了72个小时,其实想做的是标准曲线,测od的时候菌液稀释了10倍,100倍,1000倍,5000倍。但是出来的值很小,没到0.1,稀释到5000倍的菌液测得的od值是负数。还有就是初试od是什么意思呢?第一次接触 ...

菌种培养了72个小时,稀释10倍后测OD时,数值没到0.1?那不稀释原液的OD是多少?初始OD是在你配置要测的菌液时,要测OD,要不然0小时的OD怎么计量,培养了72h也好,48h小时也好,怎么绘制最后的生长曲线。是可行的,只是反应大概原菌液的浓度。
4楼2015-09-14 10:42:37
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